Reazione a catena della polimerasi (PCR) per tubercolosi

La tubercolosi è una delle malattie più pericolose da cui l'umanità soffre da centinaia di anni. Anche se gli scienziati sono stati in grado di identificare l'agente causale e inventare antibiotici per eliminarlo, il trattamento non ha sempre successo. La ragione principale è un lungo periodo di forma latente o latente della malattia, che può durare diversi anni. La diagnosi tardiva riduce significativamente le possibilità di recupero e una vita piena del paziente.

Cos'è la PCR?

Per il rilevamento della tubercolosi del micobatterio nel corpo da oltre cento anni, il test di Mantoux è stato utilizzato con successo. Altri metodi si sono dimostrati efficaci: coltura batteriologica in terreno artificiale, microscopia a striscio, ELISA. Tuttavia, un gran numero di complicazioni e risultati falsi positivi, nonché la durata di alcuni metodi, hanno richiesto l'introduzione di nuove tecnologie nella metodologia diagnostica. Un enorme passo avanti nel campo della microbiologia è stata l'emergere dell'analisi PCR per la tubercolosi. Per diversi decenni, ha dimostrato la sua efficacia ed è ampiamente utilizzato per la diagnosi differenziale di varie forme di tubercolosi.

L'analisi PCR per la tubercolosi o la reazione a catena della polimerasi è un metodo per rilevare il DNA dei batteri o dei loro frammenti, che si basa su un aumento delle molecole di acido nucleico sotto l'azione dell'enzima DNA polimerasi. Per un risultato positivo, è sufficiente una sola molecola del DNA patogeno, pertanto questo metodo è considerato altamente sensibile. La diagnosi di OCP nella tubercolosi è più efficace della semina di micobatteri in un ambiente artificiale, poiché, a differenza del metodo di coltura, consente di distinguere tra ceppi selvatici e vaccini vaccinati con BCG. Questo evita falsi positivi e rende la diagnosi più accurata.

Benefici della PCR

La diagnostica PCR per la tubercolosi consente di rilevare un bacillo di Koch in qualsiasi ambiente biologico di un organismo con la determinazione della loro composizione quantitativa anche nella fase iniziale della malattia, quando i micobatteri sono in ibernazione. La diagnosi della malattia nella fase latente consente di iniziare un trattamento profilattico nel tempo, per prevenire lo sviluppo di focolai di infiammazione nei polmoni e la comparsa di complicazioni in altri organi e sistemi. Inoltre, il test PCR per la tubercolosi ha diversi vantaggi:

• alta specificità - 90-100%;
• alta velocità - da 4 ore a 2 giorni;
• alta sensibilità, specialmente nell'immunodeficienza;
• diagnosi differenziale.

Il principale vantaggio del metodo è che la diagnosi CRC della tubercolosi nei bambini consente di distinguere la forma disseminata della malattia dalla focale limitata, anche con risultati negativi da altri test. Il test differenziale consente di scegliere il regime terapeutico corretto e aumentare l'efficacia della terapia.

L'elevata specificità dell'analisi si ottiene eliminando le reazioni incrociate con altre molecole di acido nucleico e l'elevata sensibilità consente di rilevare i micobatteri anche in un piccolo volume del materiale raccolto. Il metodo PCR dell'espettorato per la tubercolosi ha la massima affidabilità, la sua specificità raggiunge il 100% rispetto allo studio di altri materiali biologici.

Uno speciale meccanismo di PCR offre ampie opportunità per il rilevamento di bastoncini Koch in pazienti immunocompromessi. Secondo il metodo di analisi, la reazione rileva gli antigeni, quindi non importa se il corpo produce anticorpi contro il patogeno, oppure no. Pertanto, è possibile diagnosticare forme extrapolmonari della malattia e casi avanzati in pazienti con imprecisioni nel sistema immunitario, il che non è possibile utilizzando altri metodi.

Svantaggi del metodo

Nonostante i numerosi vantaggi e l'elevata sensibilità del dosaggio, la PCR per la tubercolosi può dare un risultato falso negativo. Poiché una piccola quantità di biomateriale viene presa per la diagnosi, il fatto che il patogeno "si nasconda" in una cellula o in un focus infiammatorio non è escluso e non viene rilasciato all'esterno.

La sensibilità di questo metodo nei bambini è del 25-80%. Ad esempio, in uno studio randomizzato in un gruppo di pazienti con una diagnosi clinicamente provata, un esame del sangue della PCR per tubercolosi ha dato un risultato positivo solo nel 50% dei pazienti. A questo proposito, quando si sottopone a test un bambino per micobatteri patogeni, non è possibile sostituire un metodo diagnostico con un altro. Al fine di verificare completamente l'assenza di infezione, è necessario condurre uno studio completo in diversi modi contemporaneamente.

Processo di raccolta

La condizione principale per l'affidabilità della diagnostica PCR è la conformità con le regole per la raccolta di fluidi biologici per l'analisi. Il materiale contaminato o raccolto in modo inappropriato può causare risultati errati. Le più comuni sono l'analisi dell'espettorato, del sangue e delle urine, ma per una diagnosi differenziale più profonda, è possibile prelevare campioni dal contenuto di stomaco, liquido sinoviale, liquido cerebrospinale, fluido di lavaggio bronchiale, sperma, secrezione della prostata.

L'urina PCR per la tubercolosi viene presa al mattino dopo l'igiene genitale esterna urinando in un contenitore sterile. Durante la procedura è importante non toccare le pareti interne del contenitore per impedire l'ingresso di microrganismi di terze parti. Le donne che vivono una vita sessuale regolare dovrebbero sicuramente mettere un tampone nella vagina per evitare la dimissione di terze parti.

Un esame del sangue viene effettuato al mattino a stomaco vuoto e la PCR dell'espettorato per la tubercolosi può essere eseguita in qualsiasi momento della giornata con una precedente igiene orale obbligatoria. Questo è necessario per rimuovere i residui di cibo che possono entrare nel contenitore. Quando espettorazione dell'espettorato, è importante impedire l'ingresso di saliva e muco dal rinofaringe nel contenitore, questo può distorcere i dati dell'analisi.

Lo studio del contenuto dello stomaco viene effettuato in ospedale al mattino presto, mentre l'espettorato inghiottito durante la notte è nello stomaco. Al fine di rilevare la tubercolosi del micobatterio, questo metodo rende la semina triplice, che molto probabilmente rende possibile l'isolamento di un bacillo di Koch.

Decodifica risultati

L'analisi qualitativa della PCR fornisce 2 tipi di risultati "rilevati" o "non rilevati". Rappresentano rispettivamente un verdetto positivo e uno negativo. La risposta "rilevata" significa che il DNA dell'agente infettivo è presente nel campione del test e con una probabilità del 97% che il corpo sia infetto da tubercolosi. Un risultato negativo indica l'assenza di DNA di bastoncini Koch in un campione di materiale biologico e dà una probabilità del 97% che il corpo non abbia un numero elevato di micobatteri e il 60% che la persona non sia infetta.

La più grande specificità per la diagnosi di tubercolosi è l'esame del sangue e l'espettorato. Con un risultato positivo, indicano l'infezione del corpo, che richiede misure terapeutiche urgenti. Gli studi di altri biomateriali possono indicare non il decorso della malattia, ma solo la presenza di batteri estranei. Ciò accade quando una persona è portatrice della malattia, ma non diffonde l'infezione nell'ambiente e non infetta le persone sane.

L'analisi quantitativa della PCR viene eseguita meno frequentemente e il medico curante si occupa della decodifica dei suoi risultati. Gli indicatori di ricerca sono usati per determinare l'attività della malattia e il grado di danno all'organismo. Sulla base dei dati ottenuti, uno specialista può determinare l'efficacia del trattamento e, se necessario, modificare lo schema terapeutico.

La tubercolosi è sempre stata e rimane uno dei problemi più seri per la salute di tutta l'umanità. I moderni metodi diagnostici possono rilevare la malattia in una fase precoce al fine di iniziare il trattamento in tempo. Test della tubercolina, microscopia a striscio, coltura di batteri su terreni nutrienti artificiali si sono dimostrati nel campo della diagnostica di laboratorio della tubercolosi. Tuttavia, la lunga attesa dei risultati e l'aumento della frequenza delle letture dei falsi positivi li ha resi obsoleti e hanno portato alla ribalta tecnologie più avanzate. L'analisi PCR è un metodo altamente specifico e altamente efficace per la diagnosi della tubercolosi. I suoi risultati sono i più affidabili tra tutti i metodi di laboratorio proposti per rilevare i bastoncini di Koch. Permette non solo di emettere il verdetto finale, ma anche di condurre la necessaria diagnosi differenziale.

Diagnosi PCR della tubercolosi nei bambini e negli adulti: indicazioni per

L'Organizzazione Mondiale della Sanità ha riconosciuto 20 anni fa che il tasso di diffusione della tubercolosi era fuori controllo e raggiungeva le dimensioni di un'epidemia. Da allora, la situazione non è migliorata. Più di un milione di casi di malattia vengono diagnosticati ogni anno, di cui quasi un quarto è fatale. Nell'ultimo decennio, il tasso di incidenza tra i bambini è aumentato, la maggior parte delle forme della malattia non si prestano alla terapia antibiotica standard.

Oggi, uno dei compiti globali per la medicina è lo sviluppo di tali metodi diagnostici che permetteranno di identificare la patologia prima dell'inizio dei sintomi clinici pronunciati. Uno di questi è la reazione a catena della polimerasi (PCR) per la tubercolosi, che aiuta a rilevare i bastoncini che causano la malattia di Koch nel sangue, nell'espettorato e in altri fluidi biologici.

Diagnosi di tubercolosi

I test di screening mirano a individuare pazienti, portatori di tubercolosi e prevenire la diffusione dell'infezione nella società. Per i bambini di età inferiore ai 14 anni, il test di Mantoux viene utilizzato in modo massiccio. Questo è un test immunologico in cui viene iniettata una dose di tubercolina per via sottocutanea - una miscela complessa del materiale genetico di diversi tipi di micobatteri. L'aspetto di una reazione pronunciata indica un processo infettivo che si verifica attivamente.

Per l'esame preventivo negli adulti che usano la fluorografia o i raggi x. Questi metodi aiutano a visualizzare le lesioni patologiche nel tessuto polmonare. Tuttavia, provoca difficoltà nel differenziare la tubercolosi da un'altra patologia organica (neoplasie maligne e benigne, processi infiammatori, invasioni parassitarie, danni polmonari professionali).

Per chiarire la struttura e le dimensioni del focus patologico, potrebbero essere necessari ulteriori studi strumentali:

• radiografia mirata;
• tomografia computerizzata;
• imaging a risonanza magnetica.

Metodi per la diagnosi di tubercolosi

In caso di risultati dubbi e per la nomina di una terapia adeguata, è necessario disporre di metodi diagnostici più accurati che consentano di isolare l'agente patogeno. L'esame microscopico e batteriologico dell'espettorato viene utilizzato per confermare a lungo le forme polmonari della tubercolosi.

Negli ultimi anni, l'incidenza del micobatterio di vari organi e sistemi - i reni, le ossa, l'intestino, la pelle - è diventata più frequente. Per identificare queste forme di tubercolosi, esami ecografici, coltura di urine e feci, si possono usare esami endoscopici.

La diagnostica della PCR per la tubercolosi contribuirà a confermare la presenza di bastoncini di Koch nel sangue, nonché la sua sensibilità a determinati farmaci. Questo è un metodo altamente efficace basato sulla rilevazione del materiale genetico batterico in vari fluidi biologici.

Specificità e indicazioni

La reazione a catena della polimerasi è un metodo diagnostico microbiologico altamente sensibile, basato sui principi dell'ingegneria genetica. Per confermare la presenza di un agente patogeno in un materiale biologico, è sufficiente rilevare un frammento di acido nucleico unico per esso. PCR per tubercolosi in grado di rilevare i batteri nel sangue, espettorato, urina.

Al momento, ha sviluppato diversi metodi di analisi. I più popolari tra questi sono i seguenti:

• PCR in tempo reale;
• tecnologia microfluidica;
• sequenziamento e pirosequenziamento.

PCR in tempo reale

I laboratori utilizzano più spesso la reazione a catena della polimerasi in tempo reale, poiché riduce il numero di risultati falsi positivi e il processo di analisi richiede poco tempo.

Dato il gran numero di forme nascoste della malattia e l'inefficacia dei metodi diagnostici standard, la PCR è sempre più utilizzata. Lo scopo di questa analisi è mostrato a:

• identificazione di aree sospette sulla radiografia;
• risultati dubbi del test alla tubercolina;
• l'impossibilità di condurre analisi microscopiche e batteriologiche dell'espettorato in persone in gravi condizioni;
• condurre interventi chirurgici quando è necessario assicurarsi rapidamente che non ci siano infezioni;
• l'inammissibilità all'uso della fluorografia, dei raggi X o della tomografia computerizzata (ad esempio, nelle donne in gravidanza e durante l'allattamento al seno, in caso di esposizione eccessiva alle radiazioni);
• sospetta tubercolosi extrapolmonare (si raccomanda di usare non solo il sangue ma anche la flemma).

La diagnostica PCR della tubercolosi si è dimostrata efficace nell'esame dei bambini, a causa della mancanza di esposizione aggiuntiva e di risultati rapidi.

Procedura di preparazione e analisi

Non è richiesta una preparazione speciale per la PCR del sangue. Tuttavia, al fine di evitare complicazioni del prelievo di sangue e al fine di ottenere materiali di alta qualità, è necessario attenersi alle seguenti regole generali:

• l'analisi dovrebbe essere presa al mattino non prima di 2 ore dopo il risveglio;
• Dovrebbe limitare l'assunzione di cibi grassi e fritti un giorno prima del prelievo di sangue;
• astenersi dal mangiare, tè e caffè per 8-9 ore, è permesso bere acqua pulita;
• Non fumare per almeno 3-4 ore.

Nel caso di farmaci permanenti (ormoni, anticoagulanti, farmaci antinfiammatori, antibiotici, fluidificanti del sangue), è necessario informare l'assistente di laboratorio di questo.

Al momento della consegna dell'espettorato, dovresti lavarti bene i denti e sciacquarti la bocca più volte. Raccogli materiale in un contenitore sterile. Per risultati migliori, un espettorante o agente mucolitico può essere assunto la sera.

La diagnosi stessa consiste di diverse fasi.

Materiale di recinzione. Può essere eseguito in laboratorio e da remoto. Alcuni tipi di materiale che il paziente raccoglie indipendentemente (urina, flemma).

La distruzione della struttura degli acidi nucleici (denaturazione delle molecole di DNA e RNA). Per fare questo, il materiale di prova viene riscaldato ad una temperatura di 98 gradi e tenuto per diversi minuti. Come risultato, la doppia elica si svolge, si formano molecole a filamento singolo.

Scherzo. Dopo aver aggiunto un primer (una breve sezione di acido nucleico), la temperatura diminuisce di diversi gradi, viene attivata la polimerasi.

Elognatsiya. La temperatura è portata al livello ottimale, l'attività dell'enzima raggiunge il massimo e la seconda catena è completata secondo la regola di complementarità di Chargaff.

Per completare lo studio, è necessario sintetizzare il numero richiesto di molecole di DNA - circa 50 cicli della reazione di cui sopra. Ci vogliono circa 2-3 ore. Un risultato positivo della reazione non indica sempre lo stadio attivo della malattia, ma è un indicatore della presenza di un microrganismo nel corpo.

Vantaggi e svantaggi del metodo

In confronto ad altri metodi microbiologici, la PCR non impiega molto tempo per rilevare il Mycobacterium tuberculosis mediante PCR, il risultato può essere ottenuto il giorno del test.

Un altro vantaggio è l'elevata specificità dell'analisi, che consente di rilevare la presenza dell'agente patogeno con una precisione del 90-95% in quasi tutti i biomateriali (sangue, urina, feci, liquido cerebrospinale, espettorato, vampate di bronco).

Tuttavia, ci sono diversi svantaggi del metodo:

• una percentuale piuttosto alta di risultati falsi positivi (fino al 15%), che è associato alla rilevazione di microrganismi non viventi;
• in alcuni casi, si può saltare il fatto della malattia, dal momento che il Mycobacterium tuberculosis è spesso soggetto a mutazioni e ai suoi cambiamenti nel materiale genetico;
• bassa efficienza nell'esame delle persone con immunodeficienza;
• costo elevato della ricerca, la necessità di attrezzature costose e reagenti.

Cosa può essere sostituito?

Data la varietà di forme di infezione da tubercolosi, per una diagnosi più accurata e per la scelta del trattamento è necessario combinare diversi studi diagnostici:

L'analisi obbligatoria per i bambini è il test di Mantoux. Se l'introduzione della tubercolina (materiale genetico dei micobatteri) si verifica una reazione pronunciata, si può assumere un'infezione con un bacillo tubercolare.

I metodi a raggi X possono essere utilizzati per visualizzare l'attenzione patologica. Nella diagnosi di tubercolosi extrapolmonare, vengono utilizzati metodi endoscopici con biopsia simultanea:

• la broncoscopia aiuta a identificare le lesioni della laringe, della trachea, dei bronchi;
• colonscopia - intestini;
• cistouretroscopia: organi del sistema urinario;
• isteroscopia - genitali femminili. Questi metodi non sono specifici, per fare una diagnosi accurata, l'agente patogeno dovrebbe essere identificato.

Test clinici generali aiuteranno a determinare in modo più specifico le condizioni del corpo. È richiesto un emocromo completo con formula leucocitaria.

Un aumento del numero di neutrofili con un livello ridotto di linfociti e un aumento del tasso di sedimentazione degli eritrociti (ESR) indica un processo infiammatorio attivo di eziologia batterica. Per escludere danni agli organi del sistema urinario utilizzando un'analisi generale delle urine e la coltura per la sterilità.

La PCR è attualmente disponibile nella maggior parte dei laboratori privati. Ciò richiede non solo specialisti altamente qualificati, ma anche attrezzature costose, un gran numero di reagenti. Pertanto, l'uso di questo metodo è limitato nonostante la sua alta precisione e specificità.

Analisi PCR per la diagnosi di tubercolosi

La medicina non si ferma mai e, fino ad oggi, i progressi nel settore sanitario rendono possibile diagnosticare e curare molti disturbi precedentemente non trattati. Ci sono anche malattie che non possono essere rilevate dall'ispezione visiva. La tubercolosi è sempre stata tra queste. È una malattia infettiva pericolosa che colpisce i polmoni, le articolazioni e le ossa e spesso porta alla morte anche ai giorni nostri. I metodi diagnostici per questa malattia sono stati migliorati, il che rende possibile rilevare la malattia nelle fasi iniziali quando è curabile. Tra questi non sono solo i test a raggi X e Mantoux, ma anche la PCR per la tubercolosi.

Tubercolosi: cos'è?

In precedenza, la tubercolosi era chiamata malattia secca o tisi. Questa è un'infezione batterica che colpisce più spesso i polmoni. Le sue forme extrapolmonari - la tubercolosi delle ossa e delle articolazioni, la meningite tubercolare - sono stadi meno comuni e più avanzati. L'agente eziologico di questa malattia infettiva sono i micobatteri. Il bacillo della tubercolosi è anche chiamato la bacchetta di Koch.

L'infezione da TB è molto contagiosa, viene trasmessa da goccioline trasportate dall'aria quando tossisce e starnutisce il paziente. L'unica protezione contro questo disturbo è il vaccino somministrato tempestivamente. Non protegge dall'infezione, ma non consente ai bacilli di entrare nel corpo per causare la tubercolosi.

Forme di tubercolosi

La malattia può manifestarsi sia in forma aperta che chiusa. Le differenze sono le seguenti:

• la tubercolosi chiusa è asintomatica. In tali circostanze, la bacchetta di Koch nell'espettorato è impossibile da rilevare, quindi l'infetto non è pericoloso per l'ambiente. Un tale decorso della malattia di solito non minaccia i più infetti, ma ci sono delle eccezioni: in un caso di dieci, la tubercolosi chiusa è in grado di entrare in una forma aperta;
• con una forma aperta, i micobatteri che causano la tubercolosi si trovano nella saliva e nell'espettorato del paziente. Un organismo infetto rappresenta un grande pericolo per la società, anche in isolamento. Di norma, la malattia colpisce prima i polmoni. Se non diagnosticato precocemente, può assumere altre forme, come la tubercolosi delle ossa o delle articolazioni.

La forma aperta della tubercolosi viene diagnosticata in vari modi. Il paziente subisce una radiografia del torace o una radiografia del torace, analisi del suo materiale biologico o test cutaneo di Mantoux. Recentemente, è emerso un altro metodo che è considerato ugualmente efficace: l'analisi della reazione a catena della polimerasi (PCR).

Cosa significa PCR

Nella pratica medica, sono stati a lungo usati metodi per diagnosticare questo o quel disturbo rilevando il suo DNA o RNA nel corpo umano. Questo è precisamente il PCR per la tubercolosi. Questa è un'analisi ad alta precisione del sangue o di altri fluidi biologici, che consente di identificare i batteri con un minimo della loro concentrazione nel materiale selezionato, una singola cella è sufficiente. Lo studio è condotto utilizzando uno speciale enzima polimerasi.

Vantaggi del metodo

La PCR è un metodo diagnostico che si è dimostrato dal lato migliore, quindi è usato abbastanza spesso, sia in combinazione con altri metodi che indipendentemente. I suoi vantaggi:

• i termini di produzione più brevi. Lo studio viene eseguito rapidamente, in circa 5 ore utilizzando PCR in grado di rilevare la presenza di bacillo tubercolosi nel liquido biologico del paziente. Ciò è particolarmente vero se è necessario eseguire un intervento chirurgico immediato e prima di ciò ottenere una diagnosi accurata;
• Accade che altri metodi diagnostici siano controindicati al paziente. Ad esempio, i raggi X non possono essere eseguiti da tutti. Inoltre, non è sempre possibile fare una diagnosi, soprattutto se la malattia è in una fase precoce. Con l'aiuto del metodo PCR, il patogeno viene rilevato immediatamente;
• Il fluido biologico di qualsiasi paziente è adatto per l'analisi. La PCR di urina e saliva per tubercolosi viene eseguita per identificare forme polmonari ed extrapolmonari. Lo studio viene condotto anche utilizzando il liquido spinale del paziente per rilevare la meningite tubercolare.
• Il metodo è assolutamente sicuro. Per condurlo, è sufficiente ottenere un fluido biologico dal paziente. La diagnosi di PCR della tubercolosi nei bambini è conveniente e innocua, poiché l'esame radiologico è consentito solo a partire dai 18 anni e il test di Mantoux a volte causa reazioni avverse;
• La PCR è un'analisi altamente sensibile. Ti permette di identificare i bastoncini di Koch con una concentrazione minima di micobatteri;
• Con l'aiuto di uno speciale enzima polimerasi, viene diagnosticato un disturbo in qualsiasi fase, da precoce ad avanzato;
• questo metodo è efficace nella diagnosi della ricorrenza della malattia;
• Questo metodo è un passo avanti nel fare diagnosi accurate nelle prime fasi della malattia. Ciò consente di iniziare il trattamento nel più breve tempo possibile e distruggere i patogeni, quando non hanno ancora avuto un impatto negativo irreversibile sugli organi e sui sistemi del corpo umano.

Dove eseguire l'analisi PCR per la tubercolosi

Sebbene l'analisi PCR per la tubercolosi sia un metodo molto efficace per diagnosticare questo disturbo, raramente viene utilizzata da sola. Di norma, questo è un metodo aggiuntivo per rilevare la tubercolosi e viene usato di rado. Il fatto è che questo metodo è piuttosto costoso.

Le cliniche pubbliche non hanno la possibilità di acquistare attrezzature speciali per effettuare analisi PCR, e il governo non vede il punto nel finanziamento di questo articolo, dal momento che la tubercolosi può essere diagnosticata in altri modi. Questo studio è spesso condotto in cliniche private che possono permettersi di acquistare l'attrezzatura necessaria.

Svantaggi del metodo

Il prezzo elevato non è l'unico svantaggio della PCR. Oltre al costo elevato, il metodo presenta altri inconvenienti e carenze, ad esempio:

• La PCR per la tubercolosi dà un risultato positivo anche dopo il trattamento, dal momento che prende le cellule morte come batteri vivi, pertanto questo metodo non è adatto come esame di controllo del paziente per confermare il suo recupero;
• i bacilli della tubercolosi mutano e il loro DNA viene modificato, il che può influire sull'affidabilità del risultato;
• Le analisi del sangue della PCR per la tubercolosi vengono eseguite raramente, poiché la presenza di bastoncini Koch in questi fluidi biologici è estremamente difficile da rilevare. Questo è possibile solo nelle ultime fasi o in sepsi. Di solito, l'espettorato del paziente viene preso per la diagnosi;

Vale la pena notare che il risultato più accurato è precisamente la raccolta del contenuto dello stomaco del paziente. Se si sospetta la tubercolosi polmonare, la coltura dell'espettorato sarà il modo più efficace per diagnosticare la malattia. Se il paziente ha una forma extrapolmonare, allora non ci possono essere batteri in questo bioambiente. Per determinare la tubercolosi di ossa, articolazioni, ecc. Mediante PCR, è necessario un altro fluido biologico, ad esempio il liquido spinale.

Com'è la PCR per la tubercolosi

Come descritto in precedenza, l'essenza dell'analisi PCR è identificare il DNA patogeno nel fluido biologico del paziente mediante la reazione della polimerasi. Le fasi principali del metodo:

1. Campionamento materiale biologico. La PCR non è solo un emotest - la biomassa studiata può essere saliva, urina, liquido cerebrospinale, liquido di lavaggio bronchiale, contenuto di stomaco, espettorato.
2. Successivamente, la biomassa viene esposta a temperature elevate al fine di distruggere la struttura del DNA del patogeno.
3. Quindi la temperatura diminuisce gradualmente e un primer è collegato all'elemento DNA distrutto.
4. Secondo i risultati della sintesi molecolare, che richiede circa 30 cicli, viene rilevato il ceppo di un determinato batterio patogeno o la sua assenza.

Questa analisi richiede un buon finanziamento, quindi la PCR non viene eseguita molto spesso. Tuttavia, questo metodo non ha eguali, quando altre opzioni diagnostiche sono vietate, o in caso di emergenza, quando non c'è tempo per aspettare il risultato.

Riassumendo

In conclusione, possiamo trarre le seguenti conclusioni:

• La PCR è un'analisi estremamente accurata in grado di rilevare la tubercolosi pochi giorni dopo l'infezione;
• questa analisi è fatta in 3,5 - 5 ore, quindi nel caso in cui il conto va all'ora, è insostituibile;
• è un metodo sicuro che non ha effetti collaterali;
• Viene utilizzato quando altri metodi diagnostici hanno mostrato risultati incoerenti o il loro uso è controindicato.

Tuttavia, la PCR viene raramente eseguita, dal momento che è un'analisi costosa che richiede l'installazione di attrezzature speciali. Inoltre, non è sempre informativo, quindi gli esperti utilizzano questo metodo per rilevare la tubercolosi come ulteriore.

Analisi PCR (diagnosi) della tubercolosi

Tubercolosi o consumo - una delle malattie infettive più popolari del XXI secolo. I suoi agenti patogeni sono microbatteri speciali - bastoncini di Koch.

La malattia si diffonde non solo ai polmoni, ma anche al cervello, alla digestione, alle articolazioni o alla colonna vertebrale, al sistema urinario e alla pelle.

Secondo l'OMS, ogni anno 10 milioni di persone soffrono di tubercolosi, di cui 3 milioni sono fatali.

La situazione è particolarmente triste sul territorio dei paesi della CSI, qui si verificano periodicamente epidemie tubercolari. Russia, Kazakistan, Ucraina sono guidate da una triste valutazione sulla diffusione di questa infezione.

L'infezione è facilmente trasmessa da goccioline trasportate dall'aria o attraverso il sistema digestivo, colpisce gli organi vitali ed è anche in grado di adattarsi rapidamente ai farmaci polimerici e alla chemioterapia.

Uno dei principali fattori per il successo del trattamento della tubercolosi è il rilevamento tempestivo dell'infezione.

Metodi diagnostici

L'umanità ha inventato molti metodi per riconoscere una malattia pericolosa. La diagnosi di tubercolosi è divisa in strumentale e di laboratorio.

Nel primo caso, un esame del sangue per la tubercolosi, così come l'espettorato, l'urina.

Il secondo gruppo è uno studio che utilizza raggi X ed endoscopia. I metodi strumentali per diagnosticare la tubercolosi, a loro volta, sono radiologici e chirurgici.

Tipi di metodi di radiazione per trovare la malattia

• La fluorografia è un metodo per diagnosticare una malattia familiare a tutti i residenti della CSI. Utilizzando i raggi X, vengono esaminati i polmoni e i linfonodi ilari.
• Radiografia del torace - simile alla fluorografia, ma un metodo migliore per rilevare l'infezione. L'immagine è ottenuta in maggior dettaglio e in due proiezioni, ma questa procedura è circa sei volte più costosa. Di solito è usato dopo che seri sospetti della malattia sono sorti.
• La tomografia computerizzata viene eseguita come ulteriore diagnosi, utilizzata anche dopo una buona ragione per la presenza di infezione.

I metodi chirurgici di diagnosi comprendono l'endoscopia bronchiale, la mediastinoscopia e la toracocoscopia.

Il primo metodo è quello di studiare l'albero bronchiale dei polmoni con l'aiuto di una "sonda" in questo organo. I restanti due metodi consentono di studiare la parte pleurica del polmone con la puntura del torace.

Tutti e tre i metodi sono un intervento chirurgico serio e vengono utilizzati più spesso nel processo di progressione della malattia.

I test di laboratorio includono:

• Analisi dell'espettorato per il bacillo tubercolare.
• Esame al microscopio
• Diagnosi PCR della tubercolosi

Cos'è la diagnosi PCR?

Uno dei metodi più avanzati di diagnosi di laboratorio di specialisti di infezioni chiama la reazione a catena della polimerasi.

Questo metodo è stato sviluppato dal famoso scienziato americano Carrie Mullis nel 1983, per il quale ha vinto il premio Nobel.

L'analisi PCR è l'isolamento delle particelle di DNA da espettorato, sangue, liquido cerebrospinale, feci, ecc. per la loro successiva biosintesi.

Con l'aiuto di un complesso studio genetico molecolare, viene determinata la natura dei microbi nel corpo del paziente.

Questo tipo di analisi per la tubercolosi si svolge in più fasi:

• Innanzitutto vengono presi campioni biologici. I materiali sono collocati in contenitori speciali e inviati al laboratorio.
• Nel centro di ricerca, le analisi sono riscaldate a 97 gradi. Questo rende possibile distruggere la struttura del genoma del DNA dei microrganismi, che consiste in diverse catene.
• La temperatura viene specificamente abbassata in modo che i primer (i partecipanti al DNA da cui inizia il processo di biosintesi) possano connettersi a qualsiasi catena di acido desossiribonucleico.
• Successivamente, viene eseguita la biosintesi delle molecole necessarie per il rilevamento.

Dopo 25-30 cicli ripetuti nel processo di ricerca di laboratorio, i medici hanno l'opportunità di riconoscere se microrganismi infettivi sono presenti nel corpo del paziente o meno.

Vantaggi e svantaggi

La PCR per la tubercolosi è la tecnica diagnostica più moderna. Il metodo consente di rilevare l'infezione in qualsiasi momento con elevata affidabilità. vantaggi:

• Velocità: lo studio richiede non più di cinque ore. I risultati del test per i microbi della tubercolosi possono essere trovati entro 24 ore.
• Sicurezza: il metodo PCR non ha controindicazioni di età.
• Tempestività - questa tecnica consente di rilevare la tubercolosi in quelle fasi in cui la malattia non ha sintomi.
• Alto grado di precisione - se ci sono solo pochi microrganismi nelle analisi, saranno trovati usando una reazione a catena della polimerasi. Inoltre, questa tecnica consente di identificare facilmente l'agente eziologico della tubercolosi.
• Versatilità: la diagnostica viene utilizzata non solo per rilevare il consumo, ma anche per altre malattie come la clamidia, la gonorrea, ecc.

Nonostante i numerosi vantaggi, l'uso di questa tecnica nella pratica medica domestica è l'eccezione piuttosto che la regola. Ci sono una serie di ragioni per questo.

Gli svantaggi di questo metodo sono:

• L'alto costo del sondaggio.
• Il metodo non è adatto a coloro che hanno subito una terapia, dal momento che la presenza di batteri Koch morti può portare a risultati falsi positivi.
• Nel caso di mutazione di microrganismi infettivi, il loro genoma non può essere riconosciuto facendo una falsa conclusione.
• È importante scegliere il giusto ambiente di rilevamento. Ad esempio, il risultato di un esame del sangue per PCR per tubercolosi (ingresso di diluizione) sarà negativo se il sistema nervoso è infetto.
• Non è sempre possibile applicare questo metodo a pazienti con diagnosi di lesioni polmonari.

Inoltre, tale analisi per la tubercolosi richiede attrezzature moderne che il 90% degli ospedali non possiede. Nella CSI, tale analisi può essere effettuata dalla rete di cliniche Invitro.

Termini di analisi

Le raccomandazioni per i pazienti sottoposti a tale test per la tubercolosi variano a seconda del tipo di analisi che passano.

Quando si preleva il sangue per la PCR, è necessario astenersi dal fumare un'ora prima della procedura, per due ore, per escludere alcol e cibi grassi.

Si raccomanda anche di astenersi dallo sforzo fisico, è anche impossibile prendere il sangue per la tubercolosi a stomaco vuoto.

Quando si preleva un tampone dalla bocca e dalla cavità nasale, non si può mangiare 2-4 ore prima della procedura, altrimenti non sarà informativo. Inoltre, non bere alcolici.

Per analisi accurate delle letture è vietato fumare prima di un'ora prima della procedura. Alla vigilia, astenersi dal lavarsi i denti e usare spray e spray per la bocca.

Se sospetti tubercolosi del sistema urogenitale, il paziente per 2-3 giorni prima del parto dovrebbe escludere il sesso, per 2-3 ore prima della procedura, non andare in bagno "in piccolo". Gli organi genitali dovrebbero essere lavati con acqua naturale senza mezzi speciali.

Le donne sono avvisate di non usare compresse vaginali, candele, palle e anche di astenersi dal test nei giorni critici.

5 giorni prima della consegna, il risultato è necessario abbandonare la procedura di colposcopia, così come l'ecografia transvaginale,

Quando viene utilizzata la diagnostica PCR?

Non tutte le cliniche hanno una diagnosi così complessa, ma i medici ricorrono sempre più a tali metodi di ricerca. Di solito questo tipo di analisi viene eseguito in situazioni speciali.

• In caso di risultati dubbi di manta, può essere utilizzato un esame del sangue per la tubercolosi.
• Nei casi in cui il paziente è stato in contatto con una persona infetta, ma il medico curante non può determinare con precisione la diagnosi.
• In caso di chirurgia d'urgenza, quando è necessario scoprire in breve tempo se il paziente ha questa infezione.
• Quando una paziente è incinta, quando altri metodi di ricerca non sono abbastanza sicuri per un neonato.

Va notato che questa diagnosi è raccomandata per i bambini a causa della sua sicurezza.

Se uno studente ha controindicazioni contro un test alla tubercolina, può sottoporsi a un esame del sangue per tubercolosi invece che mantenerlo mediante PCR.

Analisi PCR per tubercolosi

L'analisi PCR per la tubercolosi è la più popolare tra le ricerche mediche nel campo di questa malattia.

Ma come avvertire te stesso e i tuoi cari da questa terribile malattia? Come passare i test necessari per la PCR?

I sintomi della tubercolosi e la sua prevenzione

Gli esperti dicono che circa il 30% della popolazione totale soffre di tubercolosi.

La percentuale più alta della malattia si sviluppa in paesi non sviluppati. Questo si verifica più spesso a causa della ridotta immunità negli esseri umani.

La malattia è una delle più antiche. Questa malattia può essere trovata nel rivestimento del cervello, nel tratto digestivo, nelle articolazioni e nella colonna vertebrale, nel sistema urinario e in piccole aree della pelle umana.

Gli esperti determinano più facilmente la pelle colpita. Sul sito ci sono piccoli sigilli, che con il passare del tempo aumentano di dimensioni, esplodono con liquido biancastro.

L'agente eziologico della tubercolosi può essere spesso rilevato quando si parla con una persona malata, quando tossisce o starnutisce. Di solito, la malattia procede senza sintomi o ha una forma aperta, ma la diagnosi PCR della tubercolosi rende possibile rilevarlo nelle prime fasi e nei casi di emergenza.

Sintomi della malattia: tosse secca prolungata, febbre, brividi, sudorazione eccessiva durante la notte, forte perdita di peso, sensazione di stanchezza e debolezza.

La forma aperta della malattia è la più pericolosa. Una persona che soffre di tubercolosi è in grado di infettare le persone sane.

Il sintomo più importante della malattia polmonare è l'emottisi. Si verifica in qualsiasi forma della malattia.

In alcune situazioni, questo può portare a sanguinamento dai polmoni di una persona. È molto pericoloso e richiede un intervento medico urgente.

Per la prevenzione e il riconoscimento della tubercolosi, gli esperti prescrivono: un campione - un test della tubercolina, un esame di materiale biologico, fluorografia, raggi X e un esame del sangue, espettorato o saliva.

Diagnosi della malattia

Diagnosi migliorata della malattia - questo è corretto e durante il trattamento iniziato. Nella maggior parte dei casi, i soliti metodi di rilevamento degli agenti patogeni non hanno sempre un effetto e sono già superati.

Il modo più importante per identificare e diagnosticare la malattia polmonare sono i test di visita medica. Di solito utilizzare la diagnostica PCR. Questo sondaggio è stato scoperto abbastanza recentemente, nel 1983, dal biochimico americano Mullis.

Il test in un paziente con tubercolosi polmonare viene eseguito esclusivamente in casi particolari quando è difficile stabilire la diagnosi o è impossibile rilevare la malattia in modo strumentale.

La reazione a catena della polimerasi è un metodo PCR affidabile. Questa analisi consente di determinare l'agente eziologico di quanto è nel sangue, nell'urina e nei fluidi del midollo spinale. Tale esame medico è il più sicuro.

L'analisi PCR dà un risultato del 100%.

Ha un'alta sensibilità, che aiuta a riconoscere la malattia per la prima volta dopo l'infezione, prima che compaiano i sintomi della malattia. Questo metodo di analisi dà il risultato entro poche ore dalla consegna del materiale biologico. La semina di questa analisi viene eseguita tre volte, ma l'aspirazione dello stomaco malato viene eseguita solo in ospedale.

Sono stati sviluppati tre criteri per determinare i risultati: alta precisione, sensibilità fino al 90%, specificità.

Il test per la PCR viene utilizzato in alcuni casi:

1. diagnosticare la tubercolosi polmonare;
2. determinare la fonte della malattia;
3. definizione di localizzazione extrapolmonare;
4. diagnosi di recidiva.

Valutare il risultato e prescrivere il trattamento medico corretto, può solo uno specialista. È molto importante assegnare lo schema corretto di trattamento medico per il rilevamento della tubercolosi, è necessario condurre un test per la suscettibilità del patogeno ai dispositivi anti-tubercolari.

Una varietà di test medici per la tubercolosi

È possibile effettuare l'analisi necessaria in due modi: prendere sangue o saliva da una persona o fare espettorato.

Gli esami del sangue mediante PCR possono essere di due tipi: ELISA e PCR. Tale studio aiuta a monitorare l'efficacia delle cure mediche.

Un ELISA aiuta a trovare anticorpi nel corpo umano che resistono ai microbi della tubercolosi. Questo studio viene effettuato una volta al giorno. Il principale svantaggio è la bassa sensibilità, che consente di determinare solo una malattia con un basso livello di infezione.

La ricerca più popolare ed efficace è l'analisi sulla tubercolosi del micobatterio. Con lei, i medici possono facilmente trovare il DNA dei batteri nel sangue umano. Questo metodo viene anche utilizzato per determinare il numero di batteri, per controllare il trattamento del paziente, per rilevare la recidiva precoce.

La saliva PCR è uno dei metodi di ricerca più avanzati. Tale analisi aiuterà a identificare i batteri infettivi nella saliva. L'uso della PCR aumenta il numero di frammenti di DNA di microbi dannosi.

Il metodo di coltura è inteso per l'esame dell'espettorato umano, per la rilevazione dei microbatteri.

Preparazione per il test della PCR

Attenzione, è necessaria la corretta preparazione della saliva per la PCR. Se non vengono seguite tutte le prescrizioni, l'analisi potrebbe essere falsa positiva.

Prima di fare il test, è vietato fumare, assumere cibo e farmaci, oltre a consumare alcolici per 12 ore. È vietato lavarsi i denti, non è possibile utilizzare brillantante, deodorante per bocca e filo interdentale.

È vietato usare il rossetto e entrare in relazioni intime. Permesso di risciacquare la bocca con acqua bollita normale;

Questo esame aiuterà a identificare: herpes, clamidia, tubercolosi, patogeni di polmonite, oncovirus, barolleosi, mononucleosi, HIV, epatite di tutti i tipi, rosolia.

L'analisi per i micobatteri viene effettuata principalmente in casi controversi, vale a dire se è difficile fare una diagnosi o c'è stato contatto con un paziente affetto da tubercolosi, prima di iniziare l'operazione, per rilevare la malattia. Utilizzato per l'esame di una donna incinta, poiché questo metodo è il più sicuro per la madre e il feto.

A volte l'analisi viene eseguita in una clinica privata, dal momento che il paziente non ha rispettato le regole per il test, ma allo stesso tempo è preoccupato per tutti i sintomi. L'analisi può essere eseguita quando gli specialisti non sono sicuri dopo aver condotto un test di Mantoux o il paziente è un bambino.

Vantaggi e svantaggi dei test medici per la determinazione della tubercolosi

La PCR è il modo più popolare ed efficace per determinare la malattia.

La sua più grande differenza rispetto ad altri studi è un risultato rapido e accurato.

Il vantaggio di questa visita medica è che può essere eseguito per studi urologici, ginecologici, oncologici, infettivi, ematologici, polmonari, gastroenterologici e di altro tipo.

Il principale vantaggio di tale studio medico è che gli esami del sangue, l'espettorato e la saliva sono pronti in breve tempo (ci vorranno 5 ore per rilevare la malattia). Tale esame medico consente di condurre dei test quando determinati metodi di studio di una malattia sono proibiti o inaccessibili. Ottimo per rilevare la ricorrenza negli esseri umani.

Grazie a questa analisi, è diventato possibile condurre ricerche per qualsiasi ambiente biologico. È consentito prelevare materiale dai bambini. La PCR consente di identificare l'agente eziologico in qualsiasi stadio della malattia. A causa della sua alta sensibilità, i microbi possono essere trovati anche se sono presenti solo pochi batteri.

Il metodo PCR espande le sue capacità. Viene anche usato per determinare la paternità, per la produzione di nuovi geni, mutazioni, per incrociare elementi del DNA e così via.

Gli svantaggi di questo studio sono un metodo di indagine costoso.

Dopo un trattamento medico, un esame del sangue può mostrare la presenza di patogeni vivi o morti in piccole quantità, dopo una visita medica, darà un risultato positivo.

Batteri e microbi possono subire mutazione, dopo di che la PCR non sarà in grado di identificarli e identificarli, quindi solo uno specialista può prescrivere uno studio dell'ambiente richiesto, altrimenti tale esame medico sarà inefficace.

Dopo il test, c'è un risultato negativo, ma ciò non esclude la possibilità che una persona venga infettata dalla tubercolosi. Tale esame medico viene effettuato per i pazienti con grave malattia polmonare, quando altri studi non danno risultati accurati. La PCR sarà utile per le persone con tubercolosi polmonare ed extrapolmonare.

Sfortunatamente, le attrezzature mediche per individuare i patogeni della tubercolosi sono molto costose.

Gli ospedali e le cliniche pubbliche non possono permetterselo, ma le cliniche pagate eseguono i test dei pazienti e forniscono risultati precisi in breve tempo.

Diagnosi PCR della tubercolosi

La tubercolosi è un'infezione specifica, la sua attenzione può essere presente nei tessuti umani per anni e quindi diffondersi per diversi mesi. Questa è una malattia cronica i cui regimi terapeutici ottimali sono difficili da selezionare. Uno dei motivi di ciò è la diagnosi tardiva, quando i micobatteri, mentre nel corpo umano, si sono già adattati a molti farmaci.

Quali sono i moderni metodi di diagnosi? Diagnostica PCR - che cos'è? Come viene condotta questa ricerca? In quali casi viene diagnosticata la tubercolosi con questo metodo e qual è la sua essenza?

Che cos'è la diagnostica PCR

Questo è uno dei metodi più moderni per diagnosticare non solo le malattie, ma anche il rilevamento di materiale biologico. La diagnostica della PCR è stata inventata relativamente di recente. Circa 30 anni fa, nel 1983, un biochimico americano, Carey Banks Mullis, propose un complesso schema di recupero per il materiale biologico di microrganismi in un segmento breve. Grazie alla sua scoperta, lo scienziato ha ricevuto il premio più alto - il premio Nobel.

Che cos'è - diagnosi di PCR delle infezioni? La reazione a catena della polimerasi (PCR) è una diagnosi del rilevamento di malattie virali, basata su metodi di ingegneria genetica. È ampiamente usato in microbiologia medica, immunologia e virologia. Il metodo è universale e aiuta a fare una diagnosi con una piccola quantità di materiale. Un'infezione può essere rilevata letteralmente nelle prime ore di infezione, molto prima che compaiano i primi sintomi della malattia.

Il metodo consiste nell'ottenere dal materiale di una persona malata non il patogeno stesso, ma frammenti del genoma (particelle di DNA), la sua biosintesi con successiva determinazione a quale classe di microrganismi il materiale genetico ottenuto appartiene mediante metodi genetici molecolari.

Nonostante il fatto che si tratti di un processo complesso, ci vuole molto meno tempo rispetto a molti metodi biologici per rilevare agenti infettivi. Entro poche ore, un microrganismo può essere rilevato mediante PCR. Per fare questo, non è necessario isolarlo dall'ambiente (sangue, liquido cerebrospinale, espettorato) e farlo crescere a lungo sui terreni di coltura artificiale. È sufficiente che un piccolo frammento del filamento di DNA dell'agente infettivo sia presente nel materiale in esame.

La base della reazione è la possibilità in condizioni artificiali (in vitro) di creare la sintesi di molecole di acido nucleico dell'agente infettivo.

Cosa è necessario per la PCR?

1. I primer sono i segmenti di DNA da cui inizia la biosintesi o la creazione.
2. Nucleotidi o composti complessi che sono alla base di una molecola di DNA o RNA.
3. La reazione a catena della polimerasi è impossibile senza la presenza di polimerasi, che è un enzima che accelera la PCR.

Le fasi della diagnostica PCR

Come viene condotta la diagnosi molecolare mediante PCR? La procedura è semplice e richiede poco tempo, tenendo conto della raccolta di materiale.

1. Prima di iniziare lo studio, prendono il materiale biologico necessario - questo è l'acqua di lavaggio bronchiale, il sangue, il contenuto gastrico, l'espettorato. Il tipo di materiale biologico dipende dal presunto agente patogeno.
2. Denaturazione o distruzione della struttura primaria del DNA, che consiste in due catene. L'essenza di questo stadio è di separare i due circuiti sotto l'influenza della temperatura elevata (il massimo è 98 ºC, che non dura più di due minuti).
3. Nella fase successiva della PCR, chiamata ricottura, la temperatura viene ridotta di diversi gradi in modo che il primer si leghi al filamento del DNA.
4. Allungamento, durante il quale la sintesi delle molecole desiderate avviene direttamente.

Di conseguenza, solo 25-30 di questi cicli ricevono il numero necessario di copie del DNA del microrganismo, che sono facilmente riconoscibili.

La PCR richiede la diagnosi di tubercolosi?

Non è possibile che tutte le persone con sospetta tubercolosi eseguano la PCR, poiché il metodo richiede attrezzature costose. Non tutte le cliniche pubbliche possono permettersi di comprarlo. Inoltre, è successo che anche i soliti metodi di diagnosi di un'infezione nella maggior parte dei casi si giustificano da soli.

Questi includono:

• indagine paziente, presa della storia;
• esame completo della persona;
• uno studio che utilizza il test alla tubercolina di Mantoux;
• radiografia o fluorografia;
• diagnostica del computer, se necessario;
• metodi di ricerca microbiologica: microscopia a striscio ed esame batteriologico dell'espettorato.

La PCR per tubercolosi viene eseguita in casi particolari quando è difficile fare una diagnosi o non è possibile eseguire altri metodi strumentali.

Nonostante l'abbondanza di metodi diagnostici, l'incidenza della tubercolosi continua a crescere. Attualmente, non c'è solo la sua crescita, ma anche altre caratteristiche:

• la malattia si presenta spesso in forma grave;
• il numero di casi fatali aumenta;
• sempre più resistenti alla moderna chemioterapia sono forme diagnosticate della malattia.

La riluttanza delle persone stesse a sottoporsi annualmente ad esami medici di routine, il rifiuto della vaccinazione porta alla diffusione della tubercolosi. In tali condizioni, abbiamo bisogno di metodi di ricerca rapidi, informativi ed efficaci che dovrebbero essere accessibili a bambini e adulti. Tutti i metodi diagnostici sopra riportati sono molto inferiori alla PCR.

Benefici della diagnosi di tubercolosi con PCR

Questa ricerca, anche se nuova, si è dimostrata efficace, specialmente in casi controversi in cui è impossibile fare una diagnosi per una serie di motivi.

Grazie alla PCR, è molto più facile rilevare l'agente eziologico della tubercolosi nel materiale di prova.

I vantaggi della diagnostica PCR sono i seguenti.

1. Questa è una rapida analisi. Un piccolo frammento della molecola del DNA può essere utilizzato per diagnosticare in poche ore (circa cinque), che viene utilizzato con successo in situazioni di emergenza quando, ad esempio, prima di un'operazione è necessario determinare se una persona è malata di tubercolosi.
2. L'analisi PCR è consentita nel caso in cui altri metodi non siano disponibili o vietati (per la rilevazione della tubercolosi polmonare, a volte è necessario prendere diverse immagini radiografiche, che saranno una grande dose di radiazioni).
3. Con l'aiuto della PCR, qualsiasi ambiente biologico viene esaminato per la presenza di un agente patogeno in esso. Ad esempio, è possibile condurre uno studio sul liquido cerebrospinale, se vi è il sospetto di meningite tubercolare.
4. Diagnosi PCR consentita di malattie infettive nei bambini, perché il metodo è sicuro.
5. Ti consente di identificare l'agente patogeno in qualsiasi fase della malattia.
6. L'elevata sensibilità della PCR consente di rilevare il Mycobacterium tuberculosis, anche se nel materiale biologico sono presenti solo pochi microrganismi.
7. È bene effettuare per la diagnosi di recidiva della malattia.

Dopo tutto la PCR letta sembra un metodo diagnostico quasi perfetto, che dovrebbe rendere tutti sospettati di tubercolosi. Ma ci sono anche degli svantaggi qui, devono essere presi in considerazione.

Svantaggi della PCR nella diagnosi di tubercolosi

Nel nostro tempo, tale diagnostica è più rara della regolarità. E per questo c'è una ragione.

1. Questo è un metodo di ricerca costoso. In molte cliniche, l'attrezzatura per la PCR è assente a causa del suo alto costo, ma l'analisi può essere ancora eseguita in laboratori pagati.
2. Immediatamente dopo il trattamento, nel corpo umano possono ancora essere presenti micobatteri morti o che vivono in piccole quantità (il risultato sarà positivo durante la diagnostica PCR), quindi il metodo sarà inaffidabile in questo momento, non ha senso eseguirlo.
3. Le mutazioni dei micobatteri si traducono in PCR inefficace - una normale sequenza di filamenti di DNA non può essere sintetizzata.
4. È necessario scegliere l'ambiente giusto per lo studio, il sangue viene prelevato solo se si sospetta di essere infetto (sepsi), non è necessario prendere l'espettorato se c'è una questione di tubercolosi degli organi del sistema nervoso. In questo caso, la PCR non sarà in grado di rilevare l'agente patogeno e la diagnosi sarà poco informativa.

Indicazioni per la rilevazione della tubercolosi mediante analisi PCR

La diagnosi di PCR della tubercolosi viene eseguita più spesso in casi controversi. Quando i medici riferiscono questo studio?

1. Se è difficile fare una diagnosi usando i soliti metodi disponibili, ma c'è stato un contatto con un paziente affetto da tubercolosi.
2. Nel caso in cui una persona non possa essere consegnata a una clinica per sottoporsi a test di routine per la tubercolosi, è più facile esaminarla utilizzando la PCR, poiché l'espettorato per il test può essere consegnato in un barattolo e la diagnosi viene confermata entro poche ore.
3. Se una persona sta per avere un'operazione di emergenza ed è urgente scoprire se è malato di tubercolosi.
4. Se necessario, una donna incinta è anche meglio esaminare la tubercolosi mediante PCR, poiché il metodo è sicuro.
5. Su base retribuita, chiunque non sia stato diagnosticato la tubercolosi è stato confermato utilizzando metodi batteriologici e fluoroscopia. Questo accade quando la lesione nei polmoni è impercettibile nell'immagine diretta e la persona durante l'espettorato per lo studio non può seguire le raccomandazioni per la corretta raccolta del materiale. In questo caso, la persona è preoccupata per tutti i sintomi caratteristici della tubercolosi polmonare.
6. Quando ci sono dubbi sui risultati del test di Mantoux.
7. È preferibile fare diagnosi di PCR della tubercolosi nei bambini. La procedura è sicura, non crea ulteriore esposizione alle radiazioni ed è efficace nel rilevare forme difficili da diagnosticare della malattia.

La diagnosi tempestiva della tubercolosi è la chiave per un trattamento adeguatamente prescritto e per ridurre la diffusione della malattia. Spesso, i metodi familiari di rilevamento della malattia non sono sempre efficaci. Pertanto, la PCR oggi è uno dei metodi più affidabili e sicuri per rilevare l'infezione nelle prime fasi del suo sviluppo.