Tubercolosi o consumo - una delle malattie infettive più popolari del XXI secolo. I suoi agenti patogeni sono microbatteri speciali - bastoncini di Koch.
La malattia si diffonde non solo ai polmoni, ma anche al cervello, alla digestione, alle articolazioni o alla colonna vertebrale, al sistema urinario e alla pelle.
Secondo l'OMS, ogni anno 10 milioni di persone soffrono di tubercolosi, di cui 3 milioni sono fatali.
La situazione è particolarmente triste sul territorio dei paesi della CSI, qui si verificano periodicamente epidemie tubercolari. Russia, Kazakistan, Ucraina sono guidate da una triste valutazione sulla diffusione di questa infezione.
L'infezione è facilmente trasmessa da goccioline trasportate dall'aria o attraverso il sistema digestivo, colpisce gli organi vitali ed è anche in grado di adattarsi rapidamente ai farmaci polimerici e alla chemioterapia.
Uno dei principali fattori per il successo del trattamento della tubercolosi è il rilevamento tempestivo dell'infezione.
Metodi diagnostici
L'umanità ha inventato molti metodi per riconoscere una malattia pericolosa. La diagnosi di tubercolosi è divisa in strumentale e di laboratorio.
Nel primo caso, un esame del sangue per la tubercolosi, così come l'espettorato, l'urina.
Il secondo gruppo è uno studio che utilizza raggi X ed endoscopia. I metodi strumentali per diagnosticare la tubercolosi, a loro volta, sono radiologici e chirurgici.
Tipi di metodi di radiazione per trovare la malattia
- La fluorografia è un metodo per diagnosticare una malattia familiare a tutti i residenti della CSI. Utilizzando i raggi X, vengono esaminati i polmoni e i linfonodi ilari.
- Radiografia del torace - simile alla fluorografia, ma un metodo migliore per rilevare l'infezione. L'immagine è ottenuta in maggior dettaglio e in due proiezioni, ma questa procedura è circa sei volte più costosa. Di solito è usato dopo che seri sospetti della malattia sono sorti.
- La tomografia computerizzata viene eseguita come ulteriore diagnosi, utilizzata anche dopo una buona ragione per la presenza di infezione.
I metodi chirurgici di diagnosi comprendono l'endoscopia bronchiale, la mediastinoscopia e la toracocoscopia.
Il primo metodo è quello di studiare l'albero bronchiale dei polmoni con l'aiuto di una "sonda" in questo organo. I restanti due metodi consentono di studiare la parte pleurica del polmone con la puntura del torace.
Tutti e tre i metodi sono un intervento chirurgico serio e vengono utilizzati più spesso nel processo di progressione della malattia.
I test di laboratorio includono:
- Analisi dell'espettorato per il bacillo tubercolare.
- Esame al microscopio
- Diagnosi PCR della tubercolosi
Cos'è la diagnosi PCR?
Uno dei metodi più avanzati di diagnosi di laboratorio di specialisti di infezioni chiama la reazione a catena della polimerasi.
Questo metodo è stato sviluppato dal famoso scienziato americano Carrie Mullis nel 1983, per il quale ha vinto il premio Nobel.
L'analisi PCR è l'isolamento delle particelle di DNA da espettorato, sangue, liquido cerebrospinale, feci, ecc. per la loro successiva biosintesi.
Con l'aiuto di un complesso studio genetico molecolare, viene determinata la natura dei microbi nel corpo del paziente.
Questo tipo di analisi per la tubercolosi si svolge in più fasi:
- Innanzitutto vengono presi campioni biologici. I materiali sono collocati in contenitori speciali e inviati al laboratorio.
- Nel centro di ricerca, le analisi sono riscaldate a 97 gradi. Questo rende possibile distruggere la struttura del genoma del DNA dei microrganismi, che consiste in diverse catene.
- La temperatura viene specificamente abbassata in modo che i primer (i partecipanti al DNA da cui inizia il processo di biosintesi) possano connettersi a qualsiasi catena di acido desossiribonucleico.
- Successivamente, viene eseguita la biosintesi delle molecole necessarie per il rilevamento.
Dopo 25-30 cicli ripetuti nel processo di ricerca di laboratorio, i medici hanno l'opportunità di riconoscere se microrganismi infettivi sono presenti nel corpo del paziente o meno.
Vantaggi e svantaggi
La PCR per la tubercolosi è la tecnica diagnostica più moderna. Il metodo consente di rilevare l'infezione in qualsiasi momento con elevata affidabilità. vantaggi:
- Velocità: lo studio richiede non più di cinque ore. I risultati del test per i microbi della tubercolosi possono essere trovati entro 24 ore.
- Sicurezza: il metodo PCR non ha controindicazioni di età.
- Tempestività - questa tecnica consente di rilevare la tubercolosi in quelle fasi in cui la malattia non ha sintomi.
- Alto grado di precisione - se ci sono solo pochi microrganismi nelle analisi, saranno trovati usando una reazione a catena della polimerasi. Inoltre, questa tecnica consente di identificare facilmente l'agente eziologico della tubercolosi.
- Versatilità: la diagnostica viene utilizzata non solo per rilevare il consumo, ma anche per altre malattie come la clamidia, la gonorrea, ecc.
Nonostante i numerosi vantaggi, l'uso di questa tecnica nella pratica medica domestica è l'eccezione piuttosto che la regola. Ci sono una serie di ragioni per questo.
Gli svantaggi di questo metodo sono:
- L'alto costo del sondaggio.
- Il metodo non è adatto a coloro che hanno subito una terapia, dal momento che la presenza di batteri Koch morti può portare a risultati falsi positivi.
- Nel caso di mutazione di microrganismi infettivi, il loro genoma non può essere riconosciuto facendo una falsa conclusione.
- È importante scegliere il giusto ambiente di rilevamento. Ad esempio, il risultato di un esame del sangue per PCR per tubercolosi (ingresso di diluizione) sarà negativo se il sistema nervoso è infetto.
- Non è sempre possibile applicare questo metodo a pazienti con diagnosi di lesioni polmonari.
Inoltre, tale analisi per la tubercolosi richiede attrezzature moderne che il 90% degli ospedali non possiede. Nella CSI, tale analisi può essere effettuata dalla rete di cliniche Invitro.
Termini di analisi
Le raccomandazioni per i pazienti sottoposti a tale test per la tubercolosi variano a seconda del tipo di analisi che passano.
Quando si preleva il sangue per la PCR, è necessario astenersi dal fumare un'ora prima della procedura, per due ore, per escludere alcol e cibi grassi.
Si raccomanda anche di astenersi dallo sforzo fisico, è anche impossibile prendere il sangue per la tubercolosi a stomaco vuoto.
Quando si preleva un tampone dalla bocca e dalla cavità nasale, non si può mangiare 2-4 ore prima della procedura, altrimenti non sarà informativo. Inoltre, non bere alcolici.
Per analisi accurate delle letture è vietato fumare prima di un'ora prima della procedura. Alla vigilia, astenersi dal lavarsi i denti e usare spray e spray per la bocca.
Se sospetti tubercolosi del sistema urogenitale, il paziente per 2-3 giorni prima del parto dovrebbe escludere il sesso, per 2-3 ore prima della procedura, non andare in bagno "in piccolo". Gli organi genitali dovrebbero essere lavati con acqua naturale senza mezzi speciali.
Le donne sono avvisate di non usare compresse vaginali, candele, palle e anche di astenersi dal test nei giorni critici.
5 giorni prima della consegna, il risultato è necessario abbandonare la procedura di colposcopia, così come l'ecografia transvaginale,
Quando viene utilizzata la diagnostica PCR?
Non tutte le cliniche hanno una diagnosi così complessa, ma i medici ricorrono sempre più a tali metodi di ricerca. Di solito questo tipo di analisi viene eseguito in situazioni speciali.
- In caso di risultati dubbi di manta, può essere utilizzato un esame del sangue per la tubercolosi.
- Nei casi in cui il paziente è stato in contatto con una persona infetta, ma il medico curante non può determinare con precisione la diagnosi.
- In caso di chirurgia d'urgenza, quando è necessario scoprire in breve tempo se il paziente ha questa infezione.
- Quando una paziente è incinta, quando altri metodi di ricerca non sono abbastanza sicuri per un neonato.
Va notato che questa diagnosi è raccomandata per i bambini a causa della sua sicurezza.
Se uno studente ha controindicazioni contro un test alla tubercolina, può sottoporsi a un esame del sangue per tubercolosi invece che mantenerlo mediante PCR.
Esistono controindicazioni al test di Mantoux? Lo farà un'analisi PCR per la tubercolosi.
La tubercolosi è una malattia pericolosa che può essere trattata con successo con una diagnosi tempestiva.
Uno degli studi più istruttivi per identificare la malattia in una fase precoce è chiamato il metodo PCR (polymerase chain reaction).
L'analisi PCR non è solo la più informativa, ma anche uno degli studi più accessibili in grado di rilevare la tubercolosi nelle sue fasi iniziali.
Cos'è l'analisi PCR?
Tutti i microrganismi viventi, inclusi virus e batteri, contengono RNA e molecole di DNA nella loro struttura. Evidenziando questi acidi, è possibile dire con grande certezza quali agenti estranei sono presenti nel sangue umano e fare una diagnosi accurata.
L'essenza del metodo PCR è l'elaborazione speciale di campioni di fluidi biologici, in base al quale è possibile determinare a quali specie appartengono i microrganismi presenti.
Analisi della PCR per la tubercolosi: indicazioni, vantaggi e svantaggi
La tecnica PCR è utilizzata in persone con gravi lesioni polmonari in questi casi e manifestazioni respiratorie (tosse grave, emottisi), quando è impossibile diagnosticare accuratamente la malattia con sintomi clinici.
Si raccomanda di sottoporsi allo studio e dopo il contatto diretto con il corriere della malattia. I vantaggi che ha includono:
- velocità di esecuzione - per ottenere un risultato, non è necessario coltivare una cultura dell'agente patogeno o eseguire altre procedure complesse;
- altamente informativo: quando si diagnostica la tubercolosi, la precisione dell'analisi raggiunge il 90% e oltre;
- alta sensibilità e specificità - per identificare i patogeni nel materiale può contenere solo una cellula del virus;
- universalità - praticamente tutti i liquidi biologici sono adatti per l'analisi: espettorato, sangue, lave bronchiali.
Per confronto: l'accuratezza della microscopia degli strisci di espettorato, che viene utilizzata per rilevare la tubercolosi, è solo del 40-50% e con un basso numero di agenti patogeni è ridotta al 10% o meno. La coltura dell'espettorato è più informativa, ma occorrono da 2 a 8 settimane per ottenere risultati.
È possibile utilizzare la PCR per la tubercolosi invece di Mantoux, se la persona ha controindicazioni al campione.
Gli svantaggi della tecnica includono il rischio di ottenere un risultato falso-negativo. In altre parole, l'assenza di DNA specifico nell'espettorato, nel sangue o nelle urine non indica ancora l'assenza di tubercolosi in un paziente.
È importante Nella diagnosi di tubercolosi nei bambini, la sensibilità dell'analisi PCR è inferiore rispetto agli adulti e si aggira intorno al 25-83%.
Foto 1. Fare PCR anziché Mantoux a un bambino è una buona opzione se è allergico o spesso malato.
La procedura per l'analisi della PCR
La procedura per condurre l'analisi PCR viene effettuata per mezzo di un dispositivo speciale chiamato amplificatore e consiste di quattro fasi. Per lo studio sono necessarie sezioni di DNA da cui partono la sintesi di molecole, nucleotidi (basi di molecole di DNA), nonché polimerasi o un enzima che accelera la procedura.
- Raccolta di materiale biologico (espettorato, sangue, lavaggio bronchiale).
- Riscaldare il campione ad una temperatura di circa il 98% per distruggere la struttura primaria della catena del DNA.
- Ricottura o abbassamento della temperatura di alcuni gradi per legare il primer al filamento del DNA.
- Sintesi di molecole necessarie per produrre un risultato.
Dopo aver eseguito 25-30 di tali cicli, si forma un certo numero di copie del DNA dei virus, con cui è facile determinare l'agente eziologico della malattia.
Attenzione: l'analisi PCR non distingue i microrganismi "morti" da "viventi", quindi il risultato può essere positivo per un certo tempo dopo il trattamento.
Preparazione per l'analisi
Se si esegue un esame del sangue della PCR per la tubercolosi, non è necessario un addestramento speciale, ma i pazienti sono invitati a seguire le regole generali: astenersi da mangiare per almeno 8 ore, eliminare alcol e assumere farmaci, non fumare per un'ora prima di prendere il materiale.
L'espettorato viene raccolto al mattino dopo la spazzolatura e un accurato risciacquo della bocca.
Se l'essudato è scarsamente espulso, dovresti prendere un espettorante la sera prima o prendere l'inalazione. L'espettorato con muco, pus, macchie bianche o giallastre ha valore diagnostico.
Se non è possibile prendere l'espettorato per l'analisi, i tamponi di bronco vengono utilizzati per identificare i patogeni. Tale analisi non richiede preparazione e il materiale è preso come segue. Con l'aiuto di una siringa laringea, il paziente viene versato nella trachea una soluzione di cloruro di sodio, che provoca una forte tosse - tosse che viene utilizzata per la ricerca.
Attenzione. Il risultato dell'analisi distorce antibiotici, eparina e altri farmaci usati per il trattamento locale, quindi lo studio è raccomandato 10-14 giorni dopo la somministrazione.
Reazione a catena della polimerasi per tubercolosi
L'analisi PCR per la tubercolosi consente di identificare la malattia in tutte le fasi dello sviluppo con un numero minimo di micobatteri o anche se ci sono frammenti nel corpo umano dal DNA patogeno.
Cos'è la PCR?
La PCR è apparsa relativamente di recente. Nel 1983, il metodo è stato creato dal microbiologo americano Carey Mullis, per il quale ha ricevuto il premio Nobel. La base della PCR è il raddoppio ripetuto di una determinata regione di DNA con l'aiuto di enzimi in vitro. Di conseguenza, il DNA patogeno è di moda da visualizzare anche in presenza di quantità minime (tracce di presenza). Questo è il gold standard della specificità.
Tubercolosi PCR (processo a catena polimerica) è una procedura diagnostica per rilevare un'infezione mediante l'ingegneria genetica. Questo metodo di ricerca è utilizzato in laboratori medici microbiologici, virologici e immunologici in dubbio e praticamente poco promettenti in termini di casi di diagnosi.
Cosa è necessario per l'analisi?
L'analisi richiede 3 componenti:
- Campione di DNA
- Composti nucleotidici.
- Enzima polimerasi.
L'analisi è presentata al laboratorio come prescritto dal medico curante.
Qual è la base del metodo?
All'inizio del sondaggio, viene estratto dal biofluido un segmento di DNA microbico.
La PCR determina il tipo di agente patogeno, 2-3 ore dopo il test. Tuttavia, non ha bisogno di essere isolato da materiale biologico o crescere per un lungo periodo in laboratorio. La cosa principale è che il campione contenesse un pezzo di DNA infetto. Durante l'analisi della tubercolosi in vitro viene creata la sintesi artificiale dell'infezione da acido ribonucleico. A causa della rapida reazione dopo un paio d'ore, è possibile ottenere un risultato affidabile.
Fasi della diagnosi
La tubercolosi PCR è un metodo diagnostico semplice che ti consente di ottenere una risposta in breve tempo. Per determinare tbc, viene preso il materiale biologico di una persona infetta (sangue, espettorato, fluido biologico).
La diagnosi si svolge in tre fasi principali:
- Dopo il campionamento in laboratorio, la forma primaria del DNA viene distrutta. A una temperatura di 980 gradi, 1,5 catene vengono separate in 1,5 minuti.
- Nella fase successiva, viene eseguita la ricottura, la temperatura dell'aria viene ridotta di un paio di divisioni, il DNA è collegato al primer.
- L'ultimo stadio dello studio è chiamato allungamento. È la biosintesi delle molecole.
Per identificare il DNA desiderato con una particella di infezione, la diagnostica può essere eseguita 20-25 volte.
È necessario eseguire la PCR per la tubercolosi?
L'analisi della PCR per la tubercolosi viene sempre eseguita quando ce n'è bisogno, è inclusa nello standard di qualità dell'esame di un paziente per tubercolosi. Per eseguirlo, hai solo bisogno di un referral dal tuo medico. Molto spesso, in policlinici, vengono utilizzati altri metodi diagnostici per determinare la tubercolosi.
Questi includono:
- Interrogatorio e raccolta di anamnesi.
- Visita medica
- Test della tubercolina di Mantoux.
- Raggi X o fluorografia.
- Stati Uniti.
- Diagnosi microscopica del campione di escreato.
Nonostante il gran numero di strumenti diagnostici, il numero di infetti ogni anno è in crescita. Inoltre, la patologia ha acquisito alcune caratteristiche: la gravità del processo, un aumento dei risultati letali e l'immunità del patogeno ai farmaci.
I medici non raccomandano di abbandonare l'ispezione annuale e la vaccinazione, poiché ciò aumenta il rischio di contrarre l'infezione. L'analisi PCR ha molti vantaggi, quindi è considerata la più accurata e informativa di tutti i metodi strumentali per la rilevazione di tbc ed è ampiamente usata nelle cliniche moderne.
Qual è il valore del metodo?
Il processo a catena polimerica viene spesso utilizzato insieme a metodi aggiuntivi per rilevare l'infezione da tubercolosi. Il valore del metodo è il seguente:
- Breve tempo di permanenza. Già dopo 2-3 ore dalla donazione di sangue, è possibile rilevare la presenza di un'infezione in materiale biologico. Questo è indispensabile nei casi in cui vi è una questione di vita o di morte, e è necessario identificare la diagnosi esatta per l'intervento chirurgico.
- Alcuni metodi diagnostici hanno le loro controindicazioni e non mostrano sempre un quadro completo della diagnosi. Con l'aiuto della PCR, il patogeno viene rilevato immediatamente ed è possibile eseguire la procedura per persone di tutte le età.
- Come esempio, puoi prendere qualsiasi materiale biologico infetto. Per determinare le forme polmonari della malattia, viene presa l'urina o la saliva. Un campione di sangue aiuta a identificare tutte le forme di patologia. Il liquido spinale è necessario per determinare la meningite tubercolare.
- Metodo di sicurezza Per la ricerca richiede solo il materiale biologico del paziente. Pertanto, è una procedura completamente sicura e innocua sia per i bambini che per gli adulti, a differenza della fluorografia, che viene eseguita dall'età di 18 anni, e di Mantoux, che causa reazioni negative nel corpo.
- Test altamente sensibile. Permette di identificare la patologia anche nelle prime fasi dello sviluppo, quando il virus non ha ancora colpito tutte le cellule del corpo.
- Metodo efficace per la diagnosi di recidiva patologica.
- Un modo innovativo per identificare la bacchetta Koch fin dai primi giorni del suo sviluppo. Ciò consente di iniziare rapidamente il trattamento corretto e salvare una persona dalla morte. Nelle prime fasi dello sviluppo, la patologia può essere curata completamente senza complicazioni.
Questo metodo di diagnosi ha molti vantaggi ed è utilizzato attivamente in varie istituzioni mediche. Tuttavia, nonostante i suoi vantaggi, la PCR ha anche le sue caratteristiche negative.
Quali sono gli svantaggi?
Gli svantaggi del processo a catena del polimero includono:
- L'alto costo della procedura.
- Il metodo non è adatto per coloro che hanno già subito il trattamento con TBC, poiché le cellule infettate morte possono dare un risultato falso positivo.
- Quando la mutazione delle cellule del DNA può essere un falso risultato.
- Lo specialista deve prendere correttamente il materiale biologico necessario per determinare il tipo di infezione e il luogo della sua localizzazione.
- Non sempre consentito per i pazienti con malattia polmonare.
Chi mostra l'analisi?
Molto spesso, tale analisi è assegnata:
- Se i risultati del Mantoux hanno dato dati dubbi, il sangue viene prelevato da una vena per tubercolosi.
- Il paziente ha avuto contatti con una persona infetta, ma una visita medica non ha aiutato a determinare la diagnosi corretta.
- Durante un'operazione di emergenza, in cui è necessario conoscere nel più breve tempo possibile se il paziente è infetto.
- Durante la gravidanza, quando altri metodi diagnostici non possono fornire un risultato accurato senza danni al feto.
Dopo aver esaminato tutti i vantaggi e gli svantaggi della diagnosi di tbc, possiamo concludere che è meglio usare diversi metodi diagnostici contemporaneamente per fare una diagnosi accurata. Ciò contribuirà a garantire l'esistenza di un'infezione nel corpo e in quale stadio di progressione si trova. Avendo correttamente definito la diagnosi, sarà possibile iniziare un trattamento conservativo rapido e salvare una persona dalla morte.
Cos'è la PCR per la tubercolosi e come eseguire un test?
La PCR per la tubercolosi è prescritta quando è impossibile fare una diagnosi o è impossibile condurre altri studi. L'analisi consente di identificare la bacchetta Koch nelle prime fasi e iniziare il trattamento in modo tempestivo.
Descrizione della PCR per la tubercolosi
Indicazioni per la diagnostica PCR
Tipi di PCR per tubercolosi
Preparazione per l'analisi
Com'è la PCR per la tubercolosi
Interpretazione dei risultati del sondaggio
Peculiarità della PCR per la tubercolosi nei bambini
Quanto costa la PCR per la tubercolosi?
Commenti e recensioni
Descrizione della PCR per la tubercolosi
La PCR (polymerase chain reaction) per la tubercolosi è un'analisi accurata in grado di rilevare una bacchetta Koch in poche ore. La diagnostica si basa su metodi di ingegneria genetica. I medici isolano la cellula del DNA, usando i test gene-molecolari per determinare il tipo di patogeni.
Vantaggi del metodo
- ti permette di identificare il patogeno nelle fasi iniziali, senza la manifestazione di sintomi visibili;
- la diagnostica non ha controindicazioni ed è consentita per i bambini;
- la ricerca può essere effettuata a prendere la quantità minima di materiale.
- universalità della ricerca dei biomateriali;
- Lo studio è efficace nel determinare la ricorrenza della malattia.
Svantaggi del metodo
Oltre ai vantaggi, gli studi sulla PCR hanno anche degli svantaggi.
I principali sono:
- Lo studio non è ovunque che tu possa passare. Poiché l'apparecchiatura per tale diagnosi è costosa, è installata in laboratori a pagamento.
- La PCR per la tubercolosi può dare una risposta positiva se rileva micobatteri morti, ad esempio dopo il trattamento.
- Le mutazioni dei patogeni riducono significativamente l'efficacia del metodo PCR, dal momento che i filamenti di DNA non sono in grado di sintetizzare sequenzialmente.
- La necessità di selezionare attentamente il biomateriale per l'analisi.
Indicazioni per la diagnostica PCR
Invia al sondaggio per le seguenti indicazioni:
- Se c'era almeno un singolo contatto con un paziente affetto da tubercolosi ed è difficile identificare la malattia usando test standard.
- Ci sono situazioni in cui non è possibile portare una persona per i raggi X o altri studi. In questi casi, è molto più facile consegnare l'espettorato.
- L'analisi viene nominata alla vigilia della prossima operazione, quando è necessario determinare se una persona è malata o meno.
- Se il paziente ha un risultato dubbio della reazione di Mantoux.
- Assegnare a donne in gravidanza e bambini per evitare l'esposizione ai raggi X.
Tipi di PCR per tubercolosi
La scelta del biomateriale per lo screening per la tubercolosi dovrebbe essere nominata individualmente.
Per la diagnosi di PCR per la tubercolosi può fare dei test:
Esame del sangue
Caratteristiche del test del sangue per la tubercolosi:
- Condotto nei casi in cui altri sistemi diagnostici non sono adatti o controindicati. Ad esempio, per fare una diagnosi corretta, è necessario prendere più di una immagine a raggi X. L'esposizione eccessiva non è sicura per il corpo, quindi è molto più facile prendere il sangue da un paziente.
- Inoltre, il medico può dare indicazioni sul sangue quando riceve risultati controversi dopo la fluorografia.
Analisi della saliva
- L'analisi della saliva è meno popolare e informativa di altri studi, poiché la tubercolosi non influisce sulle ghiandole salivari. Pertanto, nella maggior parte dei casi, il risultato sarà negativo.
- Il metodo mira a identificare forme polmonari ed extrapolmonari.
- Se il colore del campione non cambia sotto l'azione del reagente, significa che non ci sono agenti patogeni. Se, tuttavia, sorge il sospetto di una malattia, viene eseguito un ulteriore complesso di analisi.
Analisi dell'espettorato
L'analisi dell'espettorato è la più informativa per individuare i patogeni della tubercolosi. I campioni vengono prelevati più volte, di regola sono sufficienti tre volte. Ciò elimina la possibilità di errori nell'ottenere materiale di scarsa qualità.
Se una persona viene infettata dalla tubercolosi, l'espettorato in piccole quantità verrà rilasciato insieme alla tosse. Nei pazienti nella fase avanzata della malattia, il muco sarà espulso con cerotti sanguinolenti.
Non è consigliabile prendere l'espettorato per l'esame se il paziente ha il sospetto di tubercolosi delle ossa o del sistema nervoso.
Analisi delle urine
L'analisi delle urine è uno dei modi per rilevare forme extrapolmonari della malattia: tubercolosi renale e sistema urinario.
Nel caso della forma polmonare della malattia, l'analisi generale delle urine è praticamente non informativo, poiché non si osservano cambiamenti patologici pronunciati.
Dal video scoprirai quale dottore fa la diagnosi di tubercolosi. Filmato dal canale tubercolo. ru.
Preparazione per l'analisi
Quando si esegue un esame del sangue, la PCR deve seguire alcune regole per ottenere un risultato affidabile:
- Si consiglia di fare un'analisi a stomaco vuoto;
- dovrebbe escludere l'alcol alla vigilia dell'indagine;
- hai bisogno di finire di prendere antibiotici 15-20 giorni prima dell'analisi;
- Si raccomanda di astenersi dal fumare per un'ora prima della raccolta del sangue.
Quando si preleva un espettorato per l'esame si raccomanda anche di seguire alcune regole:
- il materiale viene raccolto al mattino, quindi, prelavano i denti e sciacquano a fondo la cavità orale;
- se l'espettorato non si muove bene, si consiglia di prendere un espettorante la sera o inspirare;
- È necessario interrompere l'assunzione di antibiotici 15 giorni prima dell'esame.
Per ottenere un risultato affidabile dell'analisi delle urine, si raccomanda al paziente di attenersi alle seguenti regole:
- il materiale deve essere raccolto al mattino;
- alla vigilia non è consigliato mangiare cibi che possono cambiare il colore del liquido (barbabietole, mirtilli e altri);
- Interrompere l'assunzione di antibiotici per 15 giorni prima dell'esame.
Com'è la PCR per la tubercolosi
Caratteristiche del consumo di materiale:
- Un esame del sangue viene prelevato da un paziente al mattino da una vena in laboratorio.
- Per la consegna di espettorato sul muco, è necessario necessariamente dalla laringe, e preferibilmente senza una grande quantità di saliva. Il paziente deve sputare in uno speciale contenitore sterile, quindi consegnare allo studio.
- I medici prendono una raschiatura con uno strumento speciale dalla mucosa delle guance.
- L'urina viene affittata in un contenitore speciale. Prendi la parte centrale della porzione mattutina.
La reazione genetica molecolare mediante PCR viene eseguita utilizzando un dispositivo speciale chiamato amplificatore. Studiare i segmenti di DNA necessari, che inizia la sintesi delle molecole.
La tecnica consiste di quattro fasi:
- Inizialmente, il biomateriale richiesto viene raccolto per la ricerca (sangue, espettorato e saliva).
- Quindi il campione viene riscaldato a una temperatura massima di 98 gradi e non più di due minuti. Pertanto, la forma primaria della genetica del DNA viene distrutta e si formano due catene.
- Segue la ricottura o l'abbassamento della temperatura, a causa della quale il primer si lega al filo del DNA.
- L'ultimo stadio è chiamato allungamento. Questa è la sintesi di molecole, che porta al risultato finale.
Hai bisogno di spendere 25-30 di questi cicli per ottenere un certo numero di copie del DNA dei virus. Gli agenti causali della malattia sono determinati da loro.
Il contenuto informativo e l'affidabilità della diagnostica PCR sono al 100%.
Interpretazione dei risultati del sondaggio
Il tempo di produzione dell'analisi è di circa 5-6 ore.
La diagnostica con il metodo PCR fornisce 2 varianti di risultati:
- Trovato. Nel materiale che è stato studiato, è stato rilevato il DNA dell'agente tubercolare. La probabilità di infezione è del 97%. Tali pazienti vengono rapidamente inviati a un dispensario di tubercolosi, dove verrà effettuato il trattamento.
- Non rilevato. Una risposta negativa indica l'assenza dell'agente causale.
Se il risultato è positivo, il medico esegue una decodifica dettagliata, che determina lo stadio e il punto focale della malattia.
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Peculiarità della PCR per la tubercolosi nei bambini
La PCR è prescritta se il risultato di un test di Mantoux è incerto o al minimo sospetto di infezione. Fornire la procedura è sicuro per i bambini.
Analisi PCR per tubercolosi
L'analisi PCR per la tubercolosi è la più popolare tra le ricerche mediche nel campo di questa malattia.
Ma come avvertire te stesso e i tuoi cari da questa terribile malattia? Come passare i test necessari per la PCR?
I sintomi della tubercolosi e la sua prevenzione
Gli esperti dicono che circa il 30% della popolazione totale soffre di tubercolosi.
La percentuale più alta della malattia si sviluppa in paesi non sviluppati. Questo si verifica più spesso a causa della ridotta immunità negli esseri umani.
La malattia è una delle più antiche. Questa malattia può essere trovata nel rivestimento del cervello, nel tratto digestivo, nelle articolazioni e nella colonna vertebrale, nel sistema urinario e in piccole aree della pelle umana.
Gli esperti determinano più facilmente la pelle colpita. Sul sito ci sono piccoli sigilli, che con il passare del tempo aumentano di dimensioni, esplodono con liquido biancastro.
L'agente eziologico della tubercolosi può essere spesso rilevato quando si parla con una persona malata, quando tossisce o starnutisce. Di solito, la malattia procede senza sintomi o ha una forma aperta, ma la diagnosi PCR della tubercolosi rende possibile rilevarlo nelle prime fasi e nei casi di emergenza.
Sintomi della malattia: tosse secca prolungata, febbre, brividi, sudorazione eccessiva durante la notte, forte perdita di peso, sensazione di stanchezza e debolezza.
La forma aperta della malattia è la più pericolosa. Una persona che soffre di tubercolosi è in grado di infettare le persone sane.
Il sintomo più importante della malattia polmonare è l'emottisi. Si verifica in qualsiasi forma della malattia.
In alcune situazioni, questo può portare a sanguinamento dai polmoni di una persona. È molto pericoloso e richiede un intervento medico urgente.
Per la prevenzione e il riconoscimento della tubercolosi, gli esperti prescrivono: un campione - un test della tubercolina, un esame di materiale biologico, fluorografia, raggi X e un esame del sangue, espettorato o saliva.
Diagnosi della malattia
Diagnosi migliorata della malattia - questo è corretto e durante il trattamento iniziato. Nella maggior parte dei casi, i soliti metodi di rilevamento degli agenti patogeni non hanno sempre un effetto e sono già superati.
Il modo più importante per identificare e diagnosticare la malattia polmonare sono i test di visita medica. Di solito utilizzare la diagnostica PCR. Questo sondaggio è stato scoperto abbastanza recentemente, nel 1983, dal biochimico americano Mullis.
Il test in un paziente con tubercolosi polmonare viene eseguito esclusivamente in casi particolari quando è difficile stabilire la diagnosi o è impossibile rilevare la malattia in modo strumentale.
La reazione a catena della polimerasi è un metodo PCR affidabile. Questa analisi consente di determinare l'agente eziologico di quanto è nel sangue, nell'urina e nei fluidi del midollo spinale. Tale esame medico è il più sicuro.
L'analisi PCR dà un risultato del 100%.
Ha un'alta sensibilità, che aiuta a riconoscere la malattia per la prima volta dopo l'infezione, prima che compaiano i sintomi della malattia. Questo metodo di analisi dà il risultato entro poche ore dalla consegna del materiale biologico. La semina di questa analisi viene eseguita tre volte, ma l'aspirazione dello stomaco malato viene eseguita solo in ospedale.
Sono stati sviluppati tre criteri per determinare i risultati: alta precisione, sensibilità fino al 90%, specificità.
Il test per la PCR viene utilizzato in alcuni casi:
- diagnosticare la tubercolosi polmonare;
- determinare la fonte della malattia;
- definizione di localizzazione extrapolmonare;
- diagnosi di recidiva.
Valutare il risultato e prescrivere il trattamento medico corretto, può solo uno specialista. È molto importante assegnare lo schema corretto di trattamento medico per il rilevamento della tubercolosi, è necessario condurre un test per la suscettibilità del patogeno ai dispositivi anti-tubercolari.
Una varietà di test medici per la tubercolosi
È possibile effettuare l'analisi necessaria in due modi: prendere sangue o saliva da una persona o fare espettorato.
Gli esami del sangue mediante PCR possono essere di due tipi: ELISA e PCR. Tale studio aiuta a monitorare l'efficacia delle cure mediche.
Un ELISA aiuta a trovare anticorpi nel corpo umano che resistono ai microbi della tubercolosi. Questo studio viene effettuato una volta al giorno. Il principale svantaggio è la bassa sensibilità, che consente di determinare solo una malattia con un basso livello di infezione.
La ricerca più popolare ed efficace è l'analisi sulla tubercolosi del micobatterio. Con lei, i medici possono facilmente trovare il DNA dei batteri nel sangue umano. Questo metodo viene anche utilizzato per determinare il numero di batteri, per controllare il trattamento del paziente, per rilevare la recidiva precoce.
La saliva PCR è uno dei metodi di ricerca più avanzati. Tale analisi aiuterà a identificare i batteri infettivi nella saliva. L'uso della PCR aumenta il numero di frammenti di DNA di microbi dannosi.
Il metodo di coltura è inteso per l'esame dell'espettorato umano, per la rilevazione dei microbatteri.
Preparazione per il test della PCR
Attenzione, è necessaria la corretta preparazione della saliva per la PCR. Se non vengono seguite tutte le prescrizioni, l'analisi potrebbe essere falsa positiva.
Prima di fare il test, è vietato fumare, assumere cibo e farmaci, oltre a consumare alcolici per 12 ore. È vietato lavarsi i denti, non è possibile utilizzare brillantante, deodorante per bocca e filo interdentale.
È vietato usare il rossetto e entrare in relazioni intime. Permesso di risciacquare la bocca con acqua bollita normale;
Questo esame aiuterà a identificare: herpes, clamidia, tubercolosi, patogeni di polmonite, oncovirus, barolleosi, mononucleosi, HIV, epatite di tutti i tipi, rosolia.
L'analisi per i micobatteri viene effettuata principalmente in casi controversi, vale a dire se è difficile fare una diagnosi o c'è stato contatto con un paziente affetto da tubercolosi, prima di iniziare l'operazione, per rilevare la malattia. Utilizzato per l'esame di una donna incinta, poiché questo metodo è il più sicuro per la madre e il feto.
A volte l'analisi viene eseguita in una clinica privata, dal momento che il paziente non ha rispettato le regole per il test, ma allo stesso tempo è preoccupato per tutti i sintomi. L'analisi può essere eseguita quando gli specialisti non sono sicuri dopo aver condotto un test di Mantoux o il paziente è un bambino.
Vantaggi e svantaggi dei test medici per la determinazione della tubercolosi
La PCR è il modo più popolare ed efficace per determinare la malattia.
La sua più grande differenza rispetto ad altri studi è un risultato rapido e accurato.
Il vantaggio di questa visita medica è che può essere eseguito per studi urologici, ginecologici, oncologici, infettivi, ematologici, polmonari, gastroenterologici e di altro tipo.
Il principale vantaggio di tale studio medico è che gli esami del sangue, l'espettorato e la saliva sono pronti in breve tempo (ci vorranno 5 ore per rilevare la malattia). Tale esame medico consente di condurre dei test quando determinati metodi di studio di una malattia sono proibiti o inaccessibili. Ottimo per rilevare la ricorrenza negli esseri umani.
Grazie a questa analisi, è diventato possibile condurre ricerche per qualsiasi ambiente biologico. È consentito prelevare materiale dai bambini. La PCR consente di identificare l'agente eziologico in qualsiasi stadio della malattia. A causa della sua alta sensibilità, i microbi possono essere trovati anche se sono presenti solo pochi batteri.
Il metodo PCR espande le sue capacità. Viene anche usato per determinare la paternità, per la produzione di nuovi geni, mutazioni, per incrociare elementi del DNA e così via.
Gli svantaggi di questo studio sono un metodo di indagine costoso.
Dopo un trattamento medico, un esame del sangue può mostrare la presenza di patogeni vivi o morti in piccole quantità, dopo una visita medica, darà un risultato positivo.
Batteri e microbi possono subire mutazione, dopo di che la PCR non sarà in grado di identificarli e identificarli, quindi solo uno specialista può prescrivere uno studio dell'ambiente richiesto, altrimenti tale esame medico sarà inefficace.
Dopo il test, c'è un risultato negativo, ma ciò non esclude la possibilità che una persona venga infettata dalla tubercolosi. Tale esame medico viene effettuato per i pazienti con grave malattia polmonare, quando altri studi non danno risultati accurati. La PCR sarà utile per le persone con tubercolosi polmonare ed extrapolmonare.
Sfortunatamente, le attrezzature mediche per individuare i patogeni della tubercolosi sono molto costose.
Gli ospedali e le cliniche pubbliche non possono permetterselo, ma le cliniche pagate eseguono i test dei pazienti e forniscono risultati precisi in breve tempo.
Diagnosi PCR della tubercolosi
La tubercolosi è un'infezione specifica, la sua attenzione può essere presente nei tessuti umani per anni e quindi diffondersi per diversi mesi. Questa è una malattia cronica i cui regimi terapeutici ottimali sono difficili da selezionare. Uno dei motivi di ciò è la diagnosi tardiva, quando i micobatteri, mentre nel corpo umano, si sono già adattati a molti farmaci.
Quali sono i moderni metodi di diagnosi? Diagnostica PCR - che cos'è? Come viene condotta questa ricerca? In quali casi viene diagnosticata la tubercolosi con questo metodo e qual è la sua essenza?
Che cos'è la diagnostica PCR
Questo è uno dei metodi più moderni per diagnosticare non solo le malattie, ma anche il rilevamento di materiale biologico. La diagnostica della PCR è stata inventata relativamente di recente. Circa 30 anni fa, nel 1983, un biochimico americano, Carey Banks Mullis, propose un complesso schema di recupero per il materiale biologico di microrganismi in un segmento breve. Grazie alla sua scoperta, lo scienziato ha ricevuto il premio più alto - il premio Nobel.
Che cos'è - diagnosi di PCR delle infezioni? La reazione a catena della polimerasi (PCR) è una diagnosi del rilevamento di malattie virali, basata su metodi di ingegneria genetica. È ampiamente usato in microbiologia medica, immunologia e virologia. Il metodo è universale e aiuta a fare una diagnosi con una piccola quantità di materiale. Un'infezione può essere rilevata letteralmente nelle prime ore di infezione, molto prima che compaiano i primi sintomi della malattia.
Il metodo consiste nell'ottenere dal materiale di una persona malata non il patogeno stesso, ma frammenti del genoma (particelle di DNA), la sua biosintesi con successiva determinazione a quale classe di microrganismi il materiale genetico ottenuto appartiene mediante metodi genetici molecolari.
Nonostante il fatto che si tratti di un processo complesso, ci vuole molto meno tempo rispetto a molti metodi biologici per rilevare agenti infettivi. Entro poche ore, un microrganismo può essere rilevato mediante PCR. Per fare questo, non è necessario isolarlo dall'ambiente (sangue, liquido cerebrospinale, espettorato) e farlo crescere a lungo sui terreni di coltura artificiale. È sufficiente che un piccolo frammento del filamento di DNA dell'agente infettivo sia presente nel materiale in esame.
La base della reazione è la possibilità in condizioni artificiali (in vitro) di creare la sintesi di molecole di acido nucleico dell'agente infettivo.
Cosa è necessario per la PCR?
- I primer sono i segmenti di DNA da cui inizia la biosintesi o la creazione.
- Nucleotidi o composti complessi che sono alla base di una molecola di DNA o RNA.
- La reazione a catena della polimerasi è impossibile senza la presenza di polimerasi, che è un enzima che accelera la PCR.
Le fasi della diagnostica PCR
Come viene condotta la diagnosi molecolare mediante PCR? La procedura è semplice e richiede poco tempo, tenendo conto della raccolta di materiale.
- Prima di iniziare lo studio, prendono il materiale biologico necessario - questo è l'acqua di lavaggio bronchiale, il sangue, il contenuto gastrico, l'espettorato. Il tipo di materiale biologico dipende dal presunto agente patogeno.
- Denaturazione o distruzione della struttura primaria del DNA, che consiste in due catene. L'essenza di questo stadio è di separare i due circuiti sotto l'influenza della temperatura elevata (il massimo è 98 ºC, che non dura più di due minuti).
- Nella fase successiva della PCR, chiamata ricottura, la temperatura viene ridotta di diversi gradi in modo che il primer si leghi al filamento del DNA.
- Allungamento, durante il quale la sintesi delle molecole desiderate avviene direttamente.
Di conseguenza, solo 25-30 di questi cicli ricevono il numero necessario di copie del DNA del microrganismo, che sono facilmente riconoscibili.
La PCR richiede la diagnosi di tubercolosi?
Non è possibile che tutte le persone con sospetta tubercolosi eseguano la PCR, poiché il metodo richiede attrezzature costose. Non tutte le cliniche pubbliche possono permettersi di comprarlo. Inoltre, è successo che anche i soliti metodi di diagnosi di un'infezione nella maggior parte dei casi si giustificano da soli.
Questi includono:
- indagine paziente, presa della storia;
- esame completo della persona;
- uno studio che utilizza il test alla tubercolina di Mantoux;
- radiografia o fluorografia;
- diagnostica del computer, se necessario;
- metodi di ricerca microbiologica: microscopia a striscio ed esame batteriologico dell'espettorato.
La PCR per tubercolosi viene eseguita in casi particolari quando è difficile fare una diagnosi o non è possibile eseguire altri metodi strumentali.
Nonostante l'abbondanza di metodi diagnostici, l'incidenza della tubercolosi continua a crescere. Attualmente, non c'è solo la sua crescita, ma anche altre caratteristiche:
- la malattia si presenta spesso in forma grave;
- il numero di casi fatali aumenta;
- sempre più resistenti alla moderna chemioterapia sono forme diagnosticate della malattia.
La riluttanza delle persone stesse a sottoporsi annualmente ad esami medici di routine, il rifiuto della vaccinazione porta alla diffusione della tubercolosi. In tali condizioni, abbiamo bisogno di metodi di ricerca rapidi, informativi ed efficaci che dovrebbero essere accessibili a bambini e adulti. Tutti i metodi diagnostici sopra riportati sono molto inferiori alla PCR.
Benefici della diagnosi di tubercolosi con PCR
Questa ricerca, anche se nuova, si è dimostrata efficace, specialmente in casi controversi in cui è impossibile fare una diagnosi per una serie di motivi.
Grazie alla PCR, è molto più facile rilevare l'agente eziologico della tubercolosi nel materiale di prova.
I vantaggi della diagnostica PCR sono i seguenti.
- Questa è una rapida analisi. Un piccolo frammento della molecola del DNA può essere utilizzato per diagnosticare in poche ore (circa cinque), che viene utilizzato con successo in situazioni di emergenza quando, ad esempio, prima di un'operazione è necessario determinare se una persona è malata di tubercolosi.
- L'analisi PCR è consentita nel caso in cui altri metodi non siano disponibili o vietati (per la rilevazione della tubercolosi polmonare, a volte è necessario prendere diverse immagini radiografiche, che saranno una grande dose di radiazioni).
- Con l'aiuto della PCR, qualsiasi ambiente biologico viene esaminato per la presenza di un agente patogeno in esso. Ad esempio, è possibile condurre uno studio sul liquido cerebrospinale, se vi è il sospetto di meningite tubercolare.
- Diagnosi PCR consentita di malattie infettive nei bambini, perché il metodo è sicuro.
- Ti consente di identificare l'agente patogeno in qualsiasi fase della malattia.
- L'elevata sensibilità della PCR consente di rilevare il Mycobacterium tuberculosis, anche se nel materiale biologico sono presenti solo pochi microrganismi.
- È bene effettuare per la diagnosi di recidiva della malattia.
Dopo tutto la PCR letta sembra un metodo diagnostico quasi perfetto, che dovrebbe rendere tutti sospettati di tubercolosi. Ma ci sono anche degli svantaggi qui, devono essere presi in considerazione.
Svantaggi della PCR nella diagnosi di tubercolosi
Nel nostro tempo, tale diagnostica è più rara della regolarità. E per questo c'è una ragione.
- Questo è un metodo di ricerca costoso. In molte cliniche, l'attrezzatura per la PCR è assente a causa del suo alto costo, ma l'analisi può essere ancora eseguita in laboratori pagati.
- Immediatamente dopo il trattamento, nel corpo umano possono ancora essere presenti micobatteri morti o che vivono in piccole quantità (il risultato sarà positivo durante la diagnostica PCR), quindi il metodo sarà inaffidabile in questo momento, non ha senso eseguirlo.
- Le mutazioni dei micobatteri si traducono in PCR inefficace - una normale sequenza di filamenti di DNA non può essere sintetizzata.
- È necessario scegliere l'ambiente giusto per lo studio, il sangue viene prelevato solo se si sospetta di essere infetto (sepsi), non è necessario prendere l'espettorato se c'è una questione di tubercolosi degli organi del sistema nervoso. In questo caso, la PCR non sarà in grado di rilevare l'agente patogeno e la diagnosi sarà poco informativa.
Indicazioni per la rilevazione della tubercolosi mediante analisi PCR
La diagnosi di PCR della tubercolosi viene eseguita più spesso in casi controversi. Quando i medici riferiscono questo studio?
- Se è difficile fare una diagnosi usando i soliti metodi disponibili, ma c'è stato un contatto con un paziente affetto da tubercolosi.
- Nel caso in cui una persona non possa essere consegnata a una clinica per sottoporsi a test di routine per la tubercolosi, è più facile esaminarla utilizzando la PCR, poiché l'espettorato per il test può essere consegnato in un barattolo e la diagnosi viene confermata entro poche ore.
- Se una persona sta per avere un'operazione di emergenza ed è urgente scoprire se è malato di tubercolosi.
- Se necessario, una donna incinta è anche meglio esaminare la tubercolosi mediante PCR, poiché il metodo è sicuro.
- Su base retribuita, chiunque non sia stato diagnosticato la tubercolosi è stato confermato utilizzando metodi batteriologici e fluoroscopia. Questo accade quando la lesione nei polmoni è impercettibile nell'immagine diretta e la persona durante l'espettorato per lo studio non può seguire le raccomandazioni per la corretta raccolta del materiale. In questo caso, la persona è preoccupata per tutti i sintomi caratteristici della tubercolosi polmonare.
- Quando ci sono dubbi sui risultati del test di Mantoux.
- È preferibile fare diagnosi di PCR della tubercolosi nei bambini. La procedura è sicura, non crea ulteriore esposizione alle radiazioni ed è efficace nel rilevare forme difficili da diagnosticare della malattia.
La diagnosi tempestiva della tubercolosi è la chiave per un trattamento adeguatamente prescritto e per ridurre la diffusione della malattia. Spesso, i metodi familiari di rilevamento della malattia non sono sempre efficaci. Pertanto, la PCR oggi è uno dei metodi più affidabili e sicuri per rilevare l'infezione nelle prime fasi del suo sviluppo.
Vantaggi e svantaggi della PCR (a) per la diagnosi di tubercolosi
Una specifica infezione da tubercolosi è presente da molti anni nei tessuti e nelle strutture umane e in determinate circostanze si diffonde rapidamente in tutto il corpo in 2-3 mesi. A volte il miglior trattamento è molto difficile da scegliere a causa della diagnosi tardiva e dell'adattamento del patogeno a molti farmaci.
L'ultima diagnosi di PCR della tubercolosi aiuta a rilevare non solo la malattia sviluppata, ma anche il patogeno stesso, quando i primi segni della malattia non sono ancora apparsi.
Cos'è la PCR?
La diagnosi di tubercolosi mediante PCR è apparsa di recente. Nel 1983, un microbiologo americano, Cary Mullis, inventò una procedura mediante la quale i microrganismi potevano essere ricostruiti da materiale biologico in un breve segmento. Questo lavoro ha guadagnato il premio Nobel.
La PCR per la tubercolosi è un processo a catena polimerica in cui la diagnosi e la rilevazione di agenti patogeni virali mediante ingegneria genetica. La tecnica è utilizzata in laboratori immunologici, microbiologici, virologici e biochimici.
Il metodo universale aiuta i medici a diagnosticare e identificare un processo infettivo anche dopo le prime ore di infezione, molto prima della comparsa dei sintomi. La ricerca è possibile anche con una piccola quantità di biomateriale.
Cosa è necessario per l'analisi?
- Diversi segmenti di DNA (primer), con cui inizia la sintesi biologica;
- Composti nucleotidici, la base della molecola di DNA o RNA;
- Un enzima polimerasi che accelera l'analisi della PCR.
Qual è la base del metodo?
In primo luogo, un segmento di DNA viene estratto da un biomateriale da una persona infetta, utilizzando i metodi di biosintesi del gene-molecolare, il tipo di microrganismi a cui appartiene il biofragment è ulteriormente determinato.
Questa complessa reazione richiede meno tempo di alcuni biometodi. La PCR determina l'agente patogeno in poche ore, mentre non è necessario isolarlo da un fluido biologico (espettorato, sostanza cerebrospinale o sangue), non è necessario farlo crescere a lungo su un mezzo nutritivo. È sufficiente che il materiale studiato contenga un filamento di DNA di un agente patogeno infettivo.
Quando si esegue un esame del sangue PCR per tubercolosi in vitro, la sintesi degli acidi ribonucleici del micobatterio tubercolosi viene creata artificialmente.
Fasi della diagnosi
La reazione molecolare mediante PCR è una procedura semplice che richiede poco tempo. Il biomateriale richiesto è preso: sangue, espettorato, liquido di lavaggio bronchiale sono usati per determinare il tbc.
- In primo luogo, la forma primaria del DNA viene distrutta, 2 catene vengono separate ad alta temperatura (massimo 98 ° C per non più di 2 minuti);
- Quindi viene eseguita la ricottura, la temperatura primaria viene ridotta di diverse divisioni, il filamento di DNA è collegato al primer;
- Lo stadio successivo è chiamato allungamento, con la biosintesi delle strutture molecolari necessarie.
Per ottenere il numero richiesto di copie del DNA, da 25 a 30 tali cicli devono passare e il numero risultante di micobatteri è facilmente riconoscibile.
È necessario eseguire la PCR per la tubercolosi?
Direttamente a tutti i pazienti con TVC sospetta, la diagnostica a catena non viene eseguita, poiché la procedura richiede l'uso di costose apparecchiature. Non tutte le istituzioni dello stato medico ne consentono l'acquisto, soprattutto perché i metodi usuali di diagnosi del tubercolosi del micobatterio sono anch'essi informativi.
- Presa in carico accurata della storia, interrogando il paziente;
- Esame esterno;
- Test della tubercolina di Mantoux;
- Esame radiografico o fluorografico;
- Se necessario, diagnostica del computer;
- Esame microscopico o batteriologico della maschera con espettorato.
La PCR per tubercolosi viene eseguita solo quando non è possibile eseguire un'altra analisi strumentale o in circostanze difficili da diagnosticare.
Nonostante sia stato inventato un gran numero di metodi diagnostici, il numero di pazienti con tubercolosi continua a crescere. Inoltre, l'incidenza ha acquisito alcune caratteristiche: una forma grave della malattia è spesso osservata, il numero di morti aumenta, l'agente patogeno diventa resistente ai farmaci chemioterapici esistenti.
Molte persone non vogliono sottoporsi a un controllo di routine ogni anno, rifiutano la vaccinazione, il che porta ad un aumento dell'incidenza. Tali circostanze richiedono metodi di ricerca efficaci e informativi disponibili per adulti e bambini con diagnosi di TBC. La PCR ha vantaggi rispetto ad altri metodi diagnostici.
Qual è il valore del metodo?
Questa ultima ricerca si è dimostrata efficace. Se per una serie di ragioni è difficile fare una diagnosi o, in alcuni casi controversi, la PCR rileva il bacillo del tubercolo più facilmente nel materiale biologico rispetto ad altri metodi.
- Questo rapido studio, un piccolo segmento della molecola rende possibile effettuare una diagnosi accurata in poco tempo in circa 5 ore, questo viene utilizzato in casi di emergenza, ad esempio, prima di un intervento chirurgico urgente;
- Un esame del sangue per la tubercolosi è possibile quando altri metodi non sono disponibili o controindicati - a volte per il rilevamento del patogeno tbc, devono essere presi molti colpi di Rg, la dose di radiazioni è troppo grande;
- Usando la reazione della polimerasi, qualsiasi liquido biologico può essere esaminato per la presenza di micobatteri. Ad esempio, è possibile condurre uno studio sul fluido cerebrospinale con meningite tubercolare o urina con tubercolosi urogenitale;
- Il metodo è sicuro, la diagnosi di tubercolosi nei bambini che usano la PCR non causa difficoltà;
- Il metodo della reazione polimerica rivela un bacillo tubercolare in qualsiasi forma e stadio della malattia;
- La presenza di pochi batteri nel biomateriale consente di vedere la presenza di microrganismi, poiché si tratta di una reazione sensibile;
- PCR facilmente diagnostica la ricorrenza della malattia.
Nonostante l'enorme numero di vantaggi, tutti i pazienti con sospetto di studio tbc non sono fatti, poiché ci sono anche degli svantaggi, sono anche presi in considerazione.
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Video - diagnosi precoce
Quali sono gli svantaggi?
Questo metodo di diagnosi è piuttosto eccezionale che naturale, per questo ci sono delle ragioni. Prima di tutto, viene preso in considerazione l'alto costo del metodo. L'attrezzatura è costosa, le cliniche pubbliche non hanno la possibilità di acquistarlo a causa del prezzo elevato, ma la maggior parte dei laboratori pagati ha l'attrezzatura, vengono analizzati.
- Il metodo rileva i batteri morti che sono morti dopo il trattamento, mentre la PCR mostra un risultato positivo. Immediatamente dopo la chemioterapia, non ha senso condurre uno studio, poiché il risultato sarà inaffidabile;
- Le mutazioni del Mycobacterium tuberculosis sono suscettibili, il che porta all'inefficienza del metodo e il filamento del DNA non può essere sintetizzato in modo coerente.
L'ambiente per lo studio deve essere attentamente selezionato, sangue o urina possono essere raccolti solo se vi è il sospetto di infezione. L'espettorato non dovrebbe essere preso per l'esame se si sospetta tubercolosi ossea. In questa situazione, la diagnosi sarà errata.
Il sangue e l'urina di un paziente con tubercolosi da studiare su PCR sono raramente presi, l'identificazione della malattia in questo modo è discutibile. In questi media biologici, l'agente patogeno è determinato solo in sepsi o nel caso di tubercolosi disseminata. Le forme locali sono più comuni, con il loro sangue e le urine possono rimanere invariati. Il più spesso, la flemma è presa per esame.
Chi mostra l'analisi?
La maggior parte dei pazienti viene inviata per la diagnosi di PCR in casi controversi e difficili di tubercolosi. Quando i professionisti medici inviano referenze per la ricerca?
- Se c'è un contatto con una persona che è stata diagnosticata in modo affidabile con la tubercolosi, ma è difficile da diagnosticare con metodi convenzionali;
- In tali circostanze, se il paziente per fornire la clinica è impossibile per la radiografia o altre ricerche. In una situazione del genere, è più semplice ispezionarlo con il metodo del polimero. L'analisi dell'espettorato viene semplicemente consegnata al laboratorio in un apposito contenitore e il risultato diventa noto dopo poche ore;
- Prima dell'operazione, è urgente determinare se il paziente è malato di tubercolosi, nel qual caso è indicata la PCR;
- A causa della sicurezza del metodo, è possibile condurre un'indagine su una donna incinta o un bambino, senza creare un ulteriore carico radiografico;
- Risultati dei test Mantoux dubbiosi.
Chiunque lo desideri può essere esaminato a pagamento se la tubercolosi non è stata confermata con l'aiuto della batteriologia e della fluoroscopia. Ciò accade se la lesione nel tessuto polmonare è invisibile nell'immagine Rg in una proiezione diretta e il paziente non è in grado di raccogliere correttamente l'espettorato, ma i segni della tubercolosi umana sono disturbati.
La moderna reazione PCR per la diagnosi è la chiave del successo del trattamento, a seguito della quale la prevalenza della malattia diminuisce. I metodi tradizionali di identificazione dei disturbi non sempre producono l'effetto desiderato.
L'analisi della PCR fino ad oggi è diventata uno dei metodi di diagnosi affidabili e sicuri nelle prime fasi della malattia.