Qual è l'analisi PCR per la tubercolosi

Un metodo innovativo per la rilevazione di microrganismi, inventato dallo scienziato Cary Mullis alla fine del secolo scorso - analisi PCR. Ha ricevuto per i suoi scritti il ​​premio Nobel. Completamente questo processo è chiamato reazione a catena della polimerasi. Consiste nel ripristino del tipo di microrganismo nel biomateriale fornito utilizzando brevi frammenti di DNA. Ciò consente di rilevare l'infezione in una fase precoce e iniziare immediatamente il trattamento, senza causare gravi sintomi e complicanze.

Qual è l'analisi

La diagnosi mediante PCR consiste nell'ottenere segmenti di DNA patogeno da materiale biologico e allinearli nella catena corretta. Ciò consente l'identificazione del microrganismo a cui appartengono le cellule.

La procedura viene eseguita in tre fasi:

1. Raccolta di materiale biologico
2. Identificazione e allineamento del DNA.
3. Riconoscimento dell'infezione.

Questo studio richiede attrezzature mediche speciali - amplificative. È dotato di una fotocamera, in cui il materiale studiato interagisce con gli enzimi chimici e ad alta temperatura. All'uscita, il tecnico di laboratorio ha una lunga catena di DNA dell'agente causale, se ce n'è una nel corpo umano.

Come prepararsi per la diagnosi

L'analisi PCR è un complesso processo di ingegneria genetica che richiede accuratezza e serietà sia da parte dei tecnici di laboratorio che dei pazienti. Un ruolo importante nella correttezza dei risultati dell'analisi è svolto dalla preparazione per la procedura, ovvero dalla corretta raccolta di materiale.

Le principali fonti di informazione sulla malattia sono:

Altre opzioni possono essere utilizzate, i liquidi, se necessario, vengono presi per l'analisi da diversi organi.

Per il paziente, ci sono alcune regole che devono essere seguite prima della procedura. Se è presente un esame del sangue, è vietato per 8 ore prima della raccolta:

• mangiare cibo;
• fumare;
• bere bevande alcoliche;
• prendere farmaci dentro

La sera, prima di raccogliere l'espettorato, il farmaco viene bevuto per diluirlo e facilitare l'espettorazione. Al mattino, raccogliere il materiale dopo un'igiene accurata della cavità orale.

L'urina viene raccolta in un barattolo sterile al mattino a stomaco vuoto, dopo il lavaggio, prima di prendere qualsiasi farmaco.

Se una persona assume antibiotici, l'analisi della reazione a catena della polimerasi deve essere posticipata, altrimenti il ​​risultato della PCR non è affidabile. L'espettorato o il sangue devono essere donati due settimane dopo la fine del ciclo di trattamento.

Come funziona il processo di identificazione dei batteri

In breve, il processo consiste nell'isolare una porzione del DNA. L'uso di moderni metodi di ingegneria genetica ci consente di determinare il tipo di microrganismo. Inoltre, il materiale per l'analisi necessita di una piccola quantità.

Tecnicamente, questa è una procedura molto complicata, ma richiede meno tempo rispetto ai classici studi batteriologici. Gli agenti patogeni non devono essere isolati dal biomateriale, non è necessario coltivarli per diverse settimane. Il giorno della consegna, il paziente può già conoscere il risultato della sua analisi.

L'intero processo di PCR procede per fasi:

1. Il lavoro è in corso con la forma primaria del DNA, che ad alta temperatura, vicino a 100 gradi, è divisa in due catene.
2. La temperatura diminuisce, i fili sono collegati ai frammenti di acido nucleico - il primer.
3. Si verifica l'allungamento - sintesi della struttura molecolare.

L'intera sessione consiste di circa trenta di tali procedure, ripetendo un ciclo come una reazione a catena. Questo è necessario per creare il numero di celle in cui i batteri risultanti diventano riconoscibili.

Conclusione dello studio

La descrizione del risultato della PCR (reazione a catena della polimerasi) fornisce un medico della tubercolosi, è semplice o dispiegata. Nel primo caso, la descrizione conterrà solo informazioni sulla presenza o l'assenza di bastoncini Koch. Se la decodifica è dettagliata, da essa puoi scoprire l'estensione della malattia, la sua attenzione. In base a questi criteri, è possibile determinare il trattamento più appropriato per la tubercolosi in ciascun caso.

L'analisi della polimerasi della reazione a catena non distingue tra agenti patogeni vivi e morti e parla solo della loro presenza. Pertanto, ha senso passare un secondo test per la tubercolosi solo 3-4 settimane dopo il passaggio della terapia prescritta dal medico.

Se il risultato è positivo, la scritta "Mycobacterium tuberculosis" viene messa a conclusione. Se c'è un risultato negativo, accanto al nome biologico dei batteri c'è un segno "non rilevato". Le analisi possono essere false positive. Questo accade raramente - in caso di violazione della tecnica di eseguire studi sulla PCR o in presenza di microrganismi non vitali. La conclusione finale sulla malattia può essere fatta solo da un medico della tubercolosi.

Vantaggi del metodo

La diagnostica PCR della tubercolosi ha guadagnato popolarità per molte ragioni. Ha molti vantaggi, tra cui:

1. Accuratezza della ricerca Quando si analizza la tecnologia, è possibile identificare i batteri, anche se sono presenti in piccole quantità.
2. Risultato rapido L'intero processo dalla raccolta del materiale alla conclusione finale richiede circa 5 ore. Rispetto alla semina, deve attendere fino a diverse settimane.
3. Piena sicurezza per la persona, a differenza della fluorografia con la sua radiazione.
4. Viene utilizzato qualsiasi biomateriale liquido. Per l'implementazione della PCR nella tubercolosi polmonare, l'espettorato fornisce le informazioni più accurate, mentre nella meningite tubercolare viene prelevato un campione dal midollo spinale. Un esame del sangue aiuta a identificare i focolai di infezione locali.
5. Viene testata la sensibilità dei batteri agli antibiotici. Questo ti permette di prescrivere il trattamento corretto.
6. Diagnosi precoce Puoi conoscere la presenza della malattia prima dell'apparizione dei suoi sintomi.

Oltre agli aspetti positivi, ci sono anche degli svantaggi. Il principale è il prezzo. L'analisi della PCR non è economica, che è associata all'uso di costose apparecchiature. Un altro svantaggio è la necessità di attendere il tempo per un nuovo test dopo un ciclo di trattamento per la tubercolosi. A volte il risultato del test è falso positivo. Questo accade a causa di una mutazione batterica.

Quando è necessaria la PCR

La PCR per la tubercolosi polmonare non ha controindicazioni ed è assolutamente sicura. Pertanto, ci sono alcune situazioni e malattie quando questa è l'unica possibilità di ricerca.

Questi includono:

• la gravidanza;
• contatto con un paziente tubercolare;
• difficoltà nel determinare la diagnosi di malattia polmonare;
• esame prima dell'intervento;
• reazione allergica;
• Infezione da HIV;
• giovane età.

È possibile utilizzare il metodo di PCR nella direzione che viene emessa in phthisiology, nonché un pediatra, un medico o un pneumologo.

Cosa può sostituire la diagnosi PCR della tubercolosi

Altri tipi di sondaggi non sono diventati obsoleti, ma continuano ad essere utilizzati. Sono utilizzati nei casi in cui non è possibile eseguire la PCR per la tubercolosi. Inoltre, il metodo moderno non è l'ideale, a volte i suoi indicatori sono messi in discussione e richiedono un nuovo controllo.

I seguenti metodi aiutano a determinare la presenza di tubercolosi in una persona:

• diagnosi di tubercolina (Mantoux);
• radiografia del torace;
• test di materiale biologico per la flora;
• radiografia dei polmoni.

Questi studi sono gratuiti e disponibili per tutti. Ma hanno i loro svantaggi:

• Il test della tubercolosi provoca allergie. Controindicato nelle malattie della pelle.
• Gli studi radiografici sono accompagnati da radiazioni, che non è applicabile ai bambini, alle persone con immunodeficienza e alle donne in gravidanza.
• Le analisi batteriologiche richiedono molto più tempo, il risultato può essere atteso fino a un mese.

Le alternative non sono una garanzia di una conclusione corretta al cento per cento. Sono più spesso utilizzati a scopo preventivo. La diagnosi di tubercolosi mediante PCR fornisce le informazioni più affidabili. Se possibile, è meglio usarlo.

Peculiarità della tubercolosi nei bambini e necessità di PCR

Il bambino dovrebbe essere particolarmente protetto dalla malattia - l'infezione da tubercolosi può causare gravi danni all'organismo con un'immunità non ancora pienamente formata.

Dopo aver inserito la bacchetta di Koch nell'organismo dei bambini, lo sviluppo della malattia passa attraverso le seguenti fasi:

• Latente. Dura fino a un anno, senza dare alcun sintomo.
• Intossicazione. Influisce sulla salute generale Appare debolezza, apatia, mancanza di appetito, sonnolenza e prestazioni ridotte. Temperatura costantemente leggermente elevata.
• La forma primaria della malattia. La tubercolosi è localizzata, formando il centro della malattia. Il bambino ha una tosse, mancanza di respiro, mal di testa, linfonodi ingrossati.
• Bronchoadenitis tubercolare. I sintomi sono dolore alle scapole, tosse con tono variabile del suono, respiro sibilante.

Di solito, la tubercolina viene iniettata per identificare l'infezione sotto la pelle di un bambino. Se questo tipo di esame è controindicato, la PCR per la tubercolosi è un'opzione indispensabile per la diagnosi. I bambini di solito fanno un esame del sangue, ma l'espettorato viene raccolto se necessario. Al minimo sospetto della presenza di tubercolosi, vengono condotti ulteriori studi per garantire un risultato positivo e iniziare immediatamente il trattamento in una fase precoce, prevenendo lo sviluppo della malattia.

I moderni metodi di ricerca sono sempre più veloci e affidabili. È un peccato che, a causa delle costose attrezzature per effettuare tali test, non ci sia una possibilità in tutte le istituzioni e località mediche. Il modo in cui condurre l'esame viene solitamente scelto dal medico, ma il paziente ha il diritto di scegliere. Se dovessi fare un test PCR, parlaci nei commenti. Se l'articolo ti è stato utile, condividilo nei social network - forse aiuterà i tuoi amici.

Cos'è la PCR per la tubercolosi e come eseguire un test?

La PCR per la tubercolosi è prescritta quando è impossibile fare una diagnosi o è impossibile condurre altri studi. L'analisi consente di identificare la bacchetta Koch nelle prime fasi e iniziare il trattamento in modo tempestivo.

Descrizione della PCR per la tubercolosi

Indicazioni per la diagnostica PCR

Tipi di PCR per tubercolosi

Preparazione per l'analisi

Com'è la PCR per la tubercolosi

Interpretazione dei risultati del sondaggio

Peculiarità della PCR per la tubercolosi nei bambini

Quanto costa la PCR per la tubercolosi?

Commenti e recensioni

Descrizione della PCR per la tubercolosi

La PCR (polymerase chain reaction) per la tubercolosi è un'analisi accurata in grado di rilevare una bacchetta Koch in poche ore. La diagnostica si basa su metodi di ingegneria genetica. I medici isolano la cellula del DNA, usando i test gene-molecolari per determinare il tipo di patogeni.

Vantaggi del metodo

• ti permette di identificare il patogeno nelle fasi iniziali, senza la manifestazione di sintomi visibili;
• la diagnostica non ha controindicazioni ed è consentita per i bambini;
• la ricerca può essere effettuata a prendere la quantità minima di materiale.
• universalità della ricerca dei biomateriali;
• Lo studio è efficace nel determinare la ricorrenza della malattia.

Svantaggi del metodo

Oltre ai vantaggi, gli studi sulla PCR hanno anche degli svantaggi.

I principali sono:

1. Lo studio non è ovunque che tu possa passare. Poiché l'apparecchiatura per tale diagnosi è costosa, è installata in laboratori a pagamento.
2. La PCR per la tubercolosi può dare una risposta positiva se rileva micobatteri morti, ad esempio dopo il trattamento.
3. Le mutazioni dei patogeni riducono significativamente l'efficacia del metodo PCR, dal momento che i filamenti di DNA non sono in grado di sintetizzare sequenzialmente.
4. La necessità di selezionare attentamente il biomateriale per l'analisi.

Indicazioni per la diagnostica PCR

Invia al sondaggio per le seguenti indicazioni:

1. Se c'era almeno un singolo contatto con un paziente affetto da tubercolosi ed è difficile identificare la malattia usando test standard.
2. Ci sono situazioni in cui non è possibile portare una persona per i raggi X o altri studi. In questi casi, è molto più facile consegnare l'espettorato.
3. L'analisi viene nominata alla vigilia della prossima operazione, quando è necessario determinare se una persona è malata o meno.
4. Se il paziente ha un risultato dubbio della reazione di Mantoux.
5. Assegnare a donne in gravidanza e bambini per evitare l'esposizione ai raggi X.

Tipi di PCR per tubercolosi

La scelta del biomateriale per lo screening per la tubercolosi dovrebbe essere nominata individualmente.

Per la diagnosi di PCR per la tubercolosi può fare dei test:

Esame del sangue

Caratteristiche del test del sangue per la tubercolosi:

1. Condotto nei casi in cui altri sistemi diagnostici non sono adatti o controindicati. Ad esempio, per fare una diagnosi corretta, è necessario prendere più di una immagine a raggi X. L'esposizione eccessiva non è sicura per il corpo, quindi è molto più facile prendere il sangue da un paziente.
2. Inoltre, il medico può dare indicazioni sul sangue quando riceve risultati controversi dopo la fluorografia.

Analisi della saliva

1. L'analisi della saliva è meno popolare e informativa di altri studi, poiché la tubercolosi non influisce sulle ghiandole salivari. Pertanto, nella maggior parte dei casi, il risultato sarà negativo.
2. Il metodo mira a identificare forme polmonari ed extrapolmonari.
3. Se il colore del campione non cambia sotto l'azione del reagente, significa che non ci sono agenti patogeni. Se, tuttavia, sorge il sospetto di una malattia, viene eseguito un ulteriore complesso di analisi.

Analisi dell'espettorato

L'analisi dell'espettorato è la più informativa per individuare i patogeni della tubercolosi. I campioni vengono prelevati più volte, di regola sono sufficienti tre volte. Ciò elimina la possibilità di errori nell'ottenere materiale di scarsa qualità.

Se una persona viene infettata dalla tubercolosi, l'espettorato in piccole quantità verrà rilasciato insieme alla tosse. Nei pazienti nella fase avanzata della malattia, il muco sarà espulso con cerotti sanguinolenti.

Non è consigliabile prendere l'espettorato per l'esame se il paziente ha il sospetto di tubercolosi delle ossa o del sistema nervoso.

Analisi delle urine

L'analisi delle urine è uno dei modi per rilevare forme extrapolmonari della malattia: tubercolosi renale e sistema urinario.

Nel caso della forma polmonare della malattia, l'analisi generale delle urine è praticamente non informativo, poiché non si osservano cambiamenti patologici pronunciati.

Dal video scoprirai quale dottore fa la diagnosi di tubercolosi. Filmato dal canale tubercolo. ru.

Preparazione per l'analisi

Quando si esegue un esame del sangue, la PCR deve seguire alcune regole per ottenere un risultato affidabile:

• Si consiglia di fare un'analisi a stomaco vuoto;
• dovrebbe escludere l'alcol alla vigilia dell'indagine;
• hai bisogno di finire di prendere antibiotici 15-20 giorni prima dell'analisi;
• Si raccomanda di astenersi dal fumare per un'ora prima della raccolta del sangue.

Quando si preleva un espettorato per l'esame si raccomanda anche di seguire alcune regole:

• il materiale viene raccolto al mattino, quindi, prelavano i denti e sciacquano a fondo la cavità orale;
• se l'espettorato non si muove bene, si consiglia di prendere un espettorante la sera o inspirare;
• È necessario interrompere l'assunzione di antibiotici 15 giorni prima dell'esame.

Per ottenere un risultato affidabile dell'analisi delle urine, si raccomanda al paziente di attenersi alle seguenti regole:

• il materiale deve essere raccolto al mattino;
• alla vigilia non è consigliato mangiare cibi che possono cambiare il colore del liquido (barbabietole, mirtilli e altri);
• Interrompere l'assunzione di antibiotici per 15 giorni prima dell'esame.

Com'è la PCR per la tubercolosi

Caratteristiche del consumo di materiale:

1. Un esame del sangue viene prelevato da un paziente al mattino da una vena in laboratorio.
2. Per la consegna di espettorato sul muco, è necessario necessariamente dalla laringe, e preferibilmente senza una grande quantità di saliva. Il paziente deve sputare in uno speciale contenitore sterile, quindi consegnare allo studio.
3. I medici prendono una raschiatura con uno strumento speciale dalla mucosa delle guance.
4. L'urina viene affittata in un contenitore speciale. Prendi la parte centrale della porzione mattutina.

La reazione genetica molecolare mediante PCR viene eseguita utilizzando un dispositivo speciale chiamato amplificatore. Studiare i segmenti di DNA necessari, che inizia la sintesi delle molecole.

La tecnica consiste di quattro fasi:

1. Inizialmente, il biomateriale richiesto viene raccolto per la ricerca (sangue, espettorato e saliva).
2. Quindi il campione viene riscaldato a una temperatura massima di 98 gradi e non più di due minuti. Pertanto, la forma primaria della genetica del DNA viene distrutta e si formano due catene.
3. Segue la ricottura o l'abbassamento della temperatura, a causa della quale il primer si lega al filo del DNA.
4. L'ultimo stadio è chiamato allungamento. Questa è la sintesi di molecole, che porta al risultato finale.

Hai bisogno di spendere 25-30 di questi cicli per ottenere un certo numero di copie del DNA dei virus. Gli agenti causali della malattia sono determinati da loro.

Il contenuto informativo e l'affidabilità della diagnostica PCR sono al 100%.

Interpretazione dei risultati del sondaggio

Il tempo di produzione dell'analisi è di circa 5-6 ore.

La diagnostica con il metodo PCR fornisce 2 varianti di risultati:

1. Trovato. Nel materiale che è stato studiato, è stato rilevato il DNA dell'agente tubercolare. La probabilità di infezione è del 97%. Tali pazienti vengono rapidamente inviati a un dispensario di tubercolosi, dove verrà effettuato il trattamento.
2. Non rilevato. Una risposta negativa indica l'assenza dell'agente causale.

Se il risultato è positivo, il medico esegue una decodifica dettagliata, che determina lo stadio e il punto focale della malattia.

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Peculiarità della PCR per la tubercolosi nei bambini

La PCR è prescritta se il risultato di un test di Mantoux è incerto o al minimo sospetto di infezione. Fornire la procedura è sicuro per i bambini.

Diagnosi PCR della tubercolosi nei bambini e negli adulti: indicazioni per

L'Organizzazione Mondiale della Sanità ha riconosciuto 20 anni fa che il tasso di diffusione della tubercolosi era fuori controllo e raggiungeva le dimensioni di un'epidemia. Da allora, la situazione non è migliorata. Più di un milione di casi di malattia vengono diagnosticati ogni anno, di cui quasi un quarto è fatale. Nell'ultimo decennio, il tasso di incidenza tra i bambini è aumentato, la maggior parte delle forme della malattia non si prestano alla terapia antibiotica standard.

Oggi, uno dei compiti globali per la medicina è lo sviluppo di tali metodi diagnostici che permetteranno di identificare la patologia prima dell'inizio dei sintomi clinici pronunciati. Uno di questi è la reazione a catena della polimerasi (PCR) per la tubercolosi, che aiuta a rilevare i bastoncini che causano la malattia di Koch nel sangue, nell'espettorato e in altri fluidi biologici.

Diagnosi di tubercolosi

I test di screening mirano a individuare pazienti, portatori di tubercolosi e prevenire la diffusione dell'infezione nella società. Per i bambini di età inferiore ai 14 anni, il test di Mantoux viene utilizzato in modo massiccio. Questo è un test immunologico in cui viene iniettata una dose di tubercolina per via sottocutanea - una miscela complessa del materiale genetico di diversi tipi di micobatteri. L'aspetto di una reazione pronunciata indica un processo infettivo che si verifica attivamente.

Per l'esame preventivo negli adulti che usano la fluorografia o i raggi x. Questi metodi aiutano a visualizzare le lesioni patologiche nel tessuto polmonare. Tuttavia, provoca difficoltà nel differenziare la tubercolosi da un'altra patologia organica (neoplasie maligne e benigne, processi infiammatori, invasioni parassitarie, danni polmonari professionali).

Per chiarire la struttura e le dimensioni del focus patologico, potrebbero essere necessari ulteriori studi strumentali:

• radiografia mirata;
• tomografia computerizzata;
• imaging a risonanza magnetica.

Metodi per la diagnosi di tubercolosi

In caso di risultati dubbi e per la nomina di una terapia adeguata, è necessario disporre di metodi diagnostici più accurati che consentano di isolare l'agente patogeno. L'esame microscopico e batteriologico dell'espettorato viene utilizzato per confermare a lungo le forme polmonari della tubercolosi.

Negli ultimi anni, l'incidenza del micobatterio di vari organi e sistemi - i reni, le ossa, l'intestino, la pelle - è diventata più frequente. Per identificare queste forme di tubercolosi, esami ecografici, coltura di urine e feci, si possono usare esami endoscopici.

La diagnostica della PCR per la tubercolosi contribuirà a confermare la presenza di bastoncini di Koch nel sangue, nonché la sua sensibilità a determinati farmaci. Questo è un metodo altamente efficace basato sulla rilevazione del materiale genetico batterico in vari fluidi biologici.

Specificità e indicazioni

La reazione a catena della polimerasi è un metodo diagnostico microbiologico altamente sensibile, basato sui principi dell'ingegneria genetica. Per confermare la presenza di un agente patogeno in un materiale biologico, è sufficiente rilevare un frammento di acido nucleico unico per esso. PCR per tubercolosi in grado di rilevare i batteri nel sangue, espettorato, urina.

Al momento, ha sviluppato diversi metodi di analisi. I più popolari tra questi sono i seguenti:

• PCR in tempo reale;
• tecnologia microfluidica;
• sequenziamento e pirosequenziamento.

PCR in tempo reale

I laboratori utilizzano più spesso la reazione a catena della polimerasi in tempo reale, poiché riduce il numero di risultati falsi positivi e il processo di analisi richiede poco tempo.

Dato il gran numero di forme nascoste della malattia e l'inefficacia dei metodi diagnostici standard, la PCR è sempre più utilizzata. Lo scopo di questa analisi è mostrato a:

• identificazione di aree sospette sulla radiografia;
• risultati dubbi del test alla tubercolina;
• l'impossibilità di condurre analisi microscopiche e batteriologiche dell'espettorato in persone in gravi condizioni;
• condurre interventi chirurgici quando è necessario assicurarsi rapidamente che non ci siano infezioni;
• l'inammissibilità all'uso della fluorografia, dei raggi X o della tomografia computerizzata (ad esempio, nelle donne in gravidanza e durante l'allattamento al seno, in caso di esposizione eccessiva alle radiazioni);
• sospetta tubercolosi extrapolmonare (si raccomanda di usare non solo il sangue ma anche la flemma).

La diagnostica PCR della tubercolosi si è dimostrata efficace nell'esame dei bambini, a causa della mancanza di esposizione aggiuntiva e di risultati rapidi.

Procedura di preparazione e analisi

Non è richiesta una preparazione speciale per la PCR del sangue. Tuttavia, al fine di evitare complicazioni del prelievo di sangue e al fine di ottenere materiali di alta qualità, è necessario attenersi alle seguenti regole generali:

• l'analisi dovrebbe essere presa al mattino non prima di 2 ore dopo il risveglio;
• Dovrebbe limitare l'assunzione di cibi grassi e fritti un giorno prima del prelievo di sangue;
• astenersi dal mangiare, tè e caffè per 8-9 ore, è permesso bere acqua pulita;
• Non fumare per almeno 3-4 ore.

Nel caso di farmaci permanenti (ormoni, anticoagulanti, farmaci antinfiammatori, antibiotici, fluidificanti del sangue), è necessario informare l'assistente di laboratorio di questo.

Al momento della consegna dell'espettorato, dovresti lavarti bene i denti e sciacquarti la bocca più volte. Raccogli materiale in un contenitore sterile. Per risultati migliori, un espettorante o agente mucolitico può essere assunto la sera.

La diagnosi stessa consiste di diverse fasi.

Materiale di recinzione. Può essere eseguito in laboratorio e da remoto. Alcuni tipi di materiale che il paziente raccoglie indipendentemente (urina, flemma).

La distruzione della struttura degli acidi nucleici (denaturazione delle molecole di DNA e RNA). Per fare questo, il materiale di prova viene riscaldato ad una temperatura di 98 gradi e tenuto per diversi minuti. Come risultato, la doppia elica si svolge, si formano molecole a filamento singolo.

Scherzo. Dopo aver aggiunto un primer (una breve sezione di acido nucleico), la temperatura diminuisce di diversi gradi, viene attivata la polimerasi.

Elognatsiya. La temperatura è portata al livello ottimale, l'attività dell'enzima raggiunge il massimo e la seconda catena è completata secondo la regola di complementarità di Chargaff.

Per completare lo studio, è necessario sintetizzare il numero richiesto di molecole di DNA - circa 50 cicli della reazione di cui sopra. Ci vogliono circa 2-3 ore. Un risultato positivo della reazione non indica sempre lo stadio attivo della malattia, ma è un indicatore della presenza di un microrganismo nel corpo.

Vantaggi e svantaggi del metodo

In confronto ad altri metodi microbiologici, la PCR non impiega molto tempo per rilevare il Mycobacterium tuberculosis mediante PCR, il risultato può essere ottenuto il giorno del test.

Un altro vantaggio è l'elevata specificità dell'analisi, che consente di rilevare la presenza dell'agente patogeno con una precisione del 90-95% in quasi tutti i biomateriali (sangue, urina, feci, liquido cerebrospinale, espettorato, vampate di bronco).

Tuttavia, ci sono diversi svantaggi del metodo:

• una percentuale piuttosto alta di risultati falsi positivi (fino al 15%), che è associato alla rilevazione di microrganismi non viventi;
• in alcuni casi, si può saltare il fatto della malattia, dal momento che il Mycobacterium tuberculosis è spesso soggetto a mutazioni e ai suoi cambiamenti nel materiale genetico;
• bassa efficienza nell'esame delle persone con immunodeficienza;
• costo elevato della ricerca, la necessità di attrezzature costose e reagenti.

Cosa può essere sostituito?

Data la varietà di forme di infezione da tubercolosi, per una diagnosi più accurata e per la scelta del trattamento è necessario combinare diversi studi diagnostici:

L'analisi obbligatoria per i bambini è il test di Mantoux. Se l'introduzione della tubercolina (materiale genetico dei micobatteri) si verifica una reazione pronunciata, si può assumere un'infezione con un bacillo tubercolare.

I metodi a raggi X possono essere utilizzati per visualizzare l'attenzione patologica. Nella diagnosi di tubercolosi extrapolmonare, vengono utilizzati metodi endoscopici con biopsia simultanea:

• la broncoscopia aiuta a identificare le lesioni della laringe, della trachea, dei bronchi;
• colonscopia - intestini;
• cistouretroscopia: organi del sistema urinario;
• isteroscopia - genitali femminili. Questi metodi non sono specifici, per fare una diagnosi accurata, l'agente patogeno dovrebbe essere identificato.

Test clinici generali aiuteranno a determinare in modo più specifico le condizioni del corpo. È richiesto un emocromo completo con formula leucocitaria.

Un aumento del numero di neutrofili con un livello ridotto di linfociti e un aumento del tasso di sedimentazione degli eritrociti (ESR) indica un processo infiammatorio attivo di eziologia batterica. Per escludere danni agli organi del sistema urinario utilizzando un'analisi generale delle urine e la coltura per la sterilità.

La PCR è attualmente disponibile nella maggior parte dei laboratori privati. Ciò richiede non solo specialisti altamente qualificati, ma anche attrezzature costose, un gran numero di reagenti. Pertanto, l'uso di questo metodo è limitato nonostante la sua alta precisione e specificità.

Reazione a catena della polimerasi (PCR) per tubercolosi

La tubercolosi è una delle malattie più pericolose da cui l'umanità soffre da centinaia di anni. Anche se gli scienziati sono stati in grado di identificare l'agente causale e inventare antibiotici per eliminarlo, il trattamento non ha sempre successo. La ragione principale è un lungo periodo di forma latente o latente della malattia, che può durare diversi anni. La diagnosi tardiva riduce significativamente le possibilità di recupero e una vita piena del paziente.

Cos'è la PCR?

Per il rilevamento della tubercolosi del micobatterio nel corpo da oltre cento anni, il test di Mantoux è stato utilizzato con successo. Altri metodi si sono dimostrati efficaci: coltura batteriologica in terreno artificiale, microscopia a striscio, ELISA. Tuttavia, un gran numero di complicazioni e risultati falsi positivi, nonché la durata di alcuni metodi, hanno richiesto l'introduzione di nuove tecnologie nella metodologia diagnostica. Un enorme passo avanti nel campo della microbiologia è stata l'emergere dell'analisi PCR per la tubercolosi. Per diversi decenni, ha dimostrato la sua efficacia ed è ampiamente utilizzato per la diagnosi differenziale di varie forme di tubercolosi.

L'analisi PCR per la tubercolosi o la reazione a catena della polimerasi è un metodo per rilevare il DNA dei batteri o dei loro frammenti, che si basa su un aumento delle molecole di acido nucleico sotto l'azione dell'enzima DNA polimerasi. Per un risultato positivo, è sufficiente una sola molecola del DNA patogeno, pertanto questo metodo è considerato altamente sensibile. La diagnosi di OCP nella tubercolosi è più efficace della semina di micobatteri in un ambiente artificiale, poiché, a differenza del metodo di coltura, consente di distinguere tra ceppi selvatici e vaccini vaccinati con BCG. Questo evita falsi positivi e rende la diagnosi più accurata.

Benefici della PCR

La diagnostica PCR per la tubercolosi consente di rilevare un bacillo di Koch in qualsiasi ambiente biologico di un organismo con la determinazione della loro composizione quantitativa anche nella fase iniziale della malattia, quando i micobatteri sono in ibernazione. La diagnosi della malattia nella fase latente consente di iniziare un trattamento profilattico nel tempo, per prevenire lo sviluppo di focolai di infiammazione nei polmoni e la comparsa di complicazioni in altri organi e sistemi. Inoltre, il test PCR per la tubercolosi ha diversi vantaggi:

• alta specificità - 90-100%;
• alta velocità - da 4 ore a 2 giorni;
• alta sensibilità, specialmente nell'immunodeficienza;
• diagnosi differenziale.

Il principale vantaggio del metodo è che la diagnosi CRC della tubercolosi nei bambini consente di distinguere la forma disseminata della malattia dalla focale limitata, anche con risultati negativi da altri test. Il test differenziale consente di scegliere il regime terapeutico corretto e aumentare l'efficacia della terapia.

L'elevata specificità dell'analisi si ottiene eliminando le reazioni incrociate con altre molecole di acido nucleico e l'elevata sensibilità consente di rilevare i micobatteri anche in un piccolo volume del materiale raccolto. Il metodo PCR dell'espettorato per la tubercolosi ha la massima affidabilità, la sua specificità raggiunge il 100% rispetto allo studio di altri materiali biologici.

Uno speciale meccanismo di PCR offre ampie opportunità per il rilevamento di bastoncini Koch in pazienti immunocompromessi. Secondo il metodo di analisi, la reazione rileva gli antigeni, quindi non importa se il corpo produce anticorpi contro il patogeno, oppure no. Pertanto, è possibile diagnosticare forme extrapolmonari della malattia e casi avanzati in pazienti con imprecisioni nel sistema immunitario, il che non è possibile utilizzando altri metodi.

Svantaggi del metodo

Nonostante i numerosi vantaggi e l'elevata sensibilità del dosaggio, la PCR per la tubercolosi può dare un risultato falso negativo. Poiché una piccola quantità di biomateriale viene presa per la diagnosi, il fatto che il patogeno "si nasconda" in una cellula o in un focus infiammatorio non è escluso e non viene rilasciato all'esterno.

La sensibilità di questo metodo nei bambini è del 25-80%. Ad esempio, in uno studio randomizzato in un gruppo di pazienti con una diagnosi clinicamente provata, un esame del sangue della PCR per tubercolosi ha dato un risultato positivo solo nel 50% dei pazienti. A questo proposito, quando si sottopone a test un bambino per micobatteri patogeni, non è possibile sostituire un metodo diagnostico con un altro. Al fine di verificare completamente l'assenza di infezione, è necessario condurre uno studio completo in diversi modi contemporaneamente.

Processo di raccolta

La condizione principale per l'affidabilità della diagnostica PCR è la conformità con le regole per la raccolta di fluidi biologici per l'analisi. Il materiale contaminato o raccolto in modo inappropriato può causare risultati errati. Le più comuni sono l'analisi dell'espettorato, del sangue e delle urine, ma per una diagnosi differenziale più profonda, è possibile prelevare campioni dal contenuto di stomaco, liquido sinoviale, liquido cerebrospinale, fluido di lavaggio bronchiale, sperma, secrezione della prostata.

L'urina PCR per la tubercolosi viene presa al mattino dopo l'igiene genitale esterna urinando in un contenitore sterile. Durante la procedura è importante non toccare le pareti interne del contenitore per impedire l'ingresso di microrganismi di terze parti. Le donne che vivono una vita sessuale regolare dovrebbero sicuramente mettere un tampone nella vagina per evitare la dimissione di terze parti.

Un esame del sangue viene effettuato al mattino a stomaco vuoto e la PCR dell'espettorato per la tubercolosi può essere eseguita in qualsiasi momento della giornata con una precedente igiene orale obbligatoria. Questo è necessario per rimuovere i residui di cibo che possono entrare nel contenitore. Quando espettorazione dell'espettorato, è importante impedire l'ingresso di saliva e muco dal rinofaringe nel contenitore, questo può distorcere i dati dell'analisi.

Lo studio del contenuto dello stomaco viene effettuato in ospedale al mattino presto, mentre l'espettorato inghiottito durante la notte è nello stomaco. Al fine di rilevare la tubercolosi del micobatterio, questo metodo rende la semina triplice, che molto probabilmente rende possibile l'isolamento di un bacillo di Koch.

Decodifica risultati

L'analisi qualitativa della PCR fornisce 2 tipi di risultati "rilevati" o "non rilevati". Rappresentano rispettivamente un verdetto positivo e uno negativo. La risposta "rilevata" significa che il DNA dell'agente infettivo è presente nel campione del test e con una probabilità del 97% che il corpo sia infetto da tubercolosi. Un risultato negativo indica l'assenza di DNA di bastoncini Koch in un campione di materiale biologico e dà una probabilità del 97% che il corpo non abbia un numero elevato di micobatteri e il 60% che la persona non sia infetta.

La più grande specificità per la diagnosi di tubercolosi è l'esame del sangue e l'espettorato. Con un risultato positivo, indicano l'infezione del corpo, che richiede misure terapeutiche urgenti. Gli studi di altri biomateriali possono indicare non il decorso della malattia, ma solo la presenza di batteri estranei. Ciò accade quando una persona è portatrice della malattia, ma non diffonde l'infezione nell'ambiente e non infetta le persone sane.

L'analisi quantitativa della PCR viene eseguita meno frequentemente e il medico curante si occupa della decodifica dei suoi risultati. Gli indicatori di ricerca sono usati per determinare l'attività della malattia e il grado di danno all'organismo. Sulla base dei dati ottenuti, uno specialista può determinare l'efficacia del trattamento e, se necessario, modificare lo schema terapeutico.

La tubercolosi è sempre stata e rimane uno dei problemi più seri per la salute di tutta l'umanità. I moderni metodi diagnostici possono rilevare la malattia in una fase precoce al fine di iniziare il trattamento in tempo. Test della tubercolina, microscopia a striscio, coltura di batteri su terreni nutrienti artificiali si sono dimostrati nel campo della diagnostica di laboratorio della tubercolosi. Tuttavia, la lunga attesa dei risultati e l'aumento della frequenza delle letture dei falsi positivi li ha resi obsoleti e hanno portato alla ribalta tecnologie più avanzate. L'analisi PCR è un metodo altamente specifico e altamente efficace per la diagnosi della tubercolosi. I suoi risultati sono i più affidabili tra tutti i metodi di laboratorio proposti per rilevare i bastoncini di Koch. Permette non solo di emettere il verdetto finale, ma anche di condurre la necessaria diagnosi differenziale.

Reazione a catena della polimerasi per tubercolosi

L'analisi PCR per la tubercolosi consente di identificare la malattia in tutte le fasi dello sviluppo con un numero minimo di micobatteri o anche se ci sono frammenti nel corpo umano dal DNA patogeno.

Cos'è la PCR?

La PCR è apparsa relativamente di recente. Nel 1983, il metodo è stato creato dal microbiologo americano Carey Mullis, per il quale ha ricevuto il premio Nobel. La base della PCR è il raddoppio ripetuto di una determinata regione di DNA con l'aiuto di enzimi in vitro. Di conseguenza, il DNA patogeno è di moda da visualizzare anche in presenza di quantità minime (tracce di presenza). Questo è il gold standard della specificità.

Tubercolosi PCR (processo a catena polimerica) è una procedura diagnostica per rilevare un'infezione mediante l'ingegneria genetica. Questo metodo di ricerca è utilizzato in laboratori medici microbiologici, virologici e immunologici in dubbio e praticamente poco promettenti in termini di casi di diagnosi.

Cosa è necessario per l'analisi?

L'analisi richiede 3 componenti:

• Campione di DNA
• Composti nucleotidici.
• Enzima polimerasi.

L'analisi è presentata al laboratorio come prescritto dal medico curante.

Qual è la base del metodo?

All'inizio del sondaggio, viene estratto dal biofluido un segmento di DNA microbico.

La PCR determina il tipo di agente patogeno, 2-3 ore dopo il test. Tuttavia, non ha bisogno di essere isolato da materiale biologico o crescere per un lungo periodo in laboratorio. La cosa principale è che il campione contenesse un pezzo di DNA infetto. Durante l'analisi della tubercolosi in vitro viene creata la sintesi artificiale dell'infezione da acido ribonucleico. A causa della rapida reazione dopo un paio d'ore, è possibile ottenere un risultato affidabile.

Fasi della diagnosi

La tubercolosi PCR è un metodo diagnostico semplice che ti consente di ottenere una risposta in breve tempo. Per determinare tbc, viene preso il materiale biologico di una persona infetta (sangue, espettorato, fluido biologico).

La diagnosi si svolge in tre fasi principali:

• Dopo il campionamento in laboratorio, la forma primaria del DNA viene distrutta. A una temperatura di 980 gradi, 1,5 catene vengono separate in 1,5 minuti.
• Nella fase successiva, viene eseguita la ricottura, la temperatura dell'aria viene ridotta di un paio di divisioni, il DNA è collegato al primer.
• L'ultimo stadio dello studio è chiamato allungamento. È la biosintesi delle molecole.

Per identificare il DNA desiderato con una particella di infezione, la diagnostica può essere eseguita 20-25 volte.

È necessario eseguire la PCR per la tubercolosi?

L'analisi della PCR per la tubercolosi viene sempre eseguita quando ce n'è bisogno, è inclusa nello standard di qualità dell'esame di un paziente per tubercolosi. Per eseguirlo, hai solo bisogno di un referral dal tuo medico. Molto spesso, in policlinici, vengono utilizzati altri metodi diagnostici per determinare la tubercolosi.

Questi includono:

• Interrogatorio e raccolta di anamnesi.
• Visita medica
• Test della tubercolina di Mantoux.
• Raggi X o fluorografia.
• Stati Uniti.
• Diagnosi microscopica del campione di escreato.

Nonostante il gran numero di strumenti diagnostici, il numero di infetti ogni anno è in crescita. Inoltre, la patologia ha acquisito alcune caratteristiche: la gravità del processo, un aumento dei risultati letali e l'immunità del patogeno ai farmaci.

I medici non raccomandano di abbandonare l'ispezione annuale e la vaccinazione, poiché ciò aumenta il rischio di contrarre l'infezione. L'analisi PCR ha molti vantaggi, quindi è considerata la più accurata e informativa di tutti i metodi strumentali per la rilevazione di tbc ed è ampiamente usata nelle cliniche moderne.

Qual è il valore del metodo?

Il processo a catena polimerica viene spesso utilizzato insieme a metodi aggiuntivi per rilevare l'infezione da tubercolosi. Il valore del metodo è il seguente:

• Breve tempo di permanenza. Già dopo 2-3 ore dalla donazione di sangue, è possibile rilevare la presenza di un'infezione in materiale biologico. Questo è indispensabile nei casi in cui vi è una questione di vita o di morte, e è necessario identificare la diagnosi esatta per l'intervento chirurgico.
• Alcuni metodi diagnostici hanno le loro controindicazioni e non mostrano sempre un quadro completo della diagnosi. Con l'aiuto della PCR, il patogeno viene rilevato immediatamente ed è possibile eseguire la procedura per persone di tutte le età.
• Come esempio, puoi prendere qualsiasi materiale biologico infetto. Per determinare le forme polmonari della malattia, viene presa l'urina o la saliva. Un campione di sangue aiuta a identificare tutte le forme di patologia. Il liquido spinale è necessario per determinare la meningite tubercolare.
• Metodo di sicurezza Per la ricerca richiede solo il materiale biologico del paziente. Pertanto, è una procedura completamente sicura e innocua sia per i bambini che per gli adulti, a differenza della fluorografia, che viene eseguita dall'età di 18 anni, e di Mantoux, che causa reazioni negative nel corpo.
• Test altamente sensibile. Permette di identificare la patologia anche nelle prime fasi dello sviluppo, quando il virus non ha ancora colpito tutte le cellule del corpo.
• Metodo efficace per la diagnosi di recidiva patologica.
• Un modo innovativo per identificare la bacchetta Koch fin dai primi giorni del suo sviluppo. Ciò consente di iniziare rapidamente il trattamento corretto e salvare una persona dalla morte. Nelle prime fasi dello sviluppo, la patologia può essere curata completamente senza complicazioni.

Questo metodo di diagnosi ha molti vantaggi ed è utilizzato attivamente in varie istituzioni mediche. Tuttavia, nonostante i suoi vantaggi, la PCR ha anche le sue caratteristiche negative.

Quali sono gli svantaggi?

Gli svantaggi del processo a catena del polimero includono:

• L'alto costo della procedura.
• Il metodo non è adatto per coloro che hanno già subito il trattamento con TBC, poiché le cellule infettate morte possono dare un risultato falso positivo.
• Quando la mutazione delle cellule del DNA può essere un falso risultato.
• Lo specialista deve prendere correttamente il materiale biologico necessario per determinare il tipo di infezione e il luogo della sua localizzazione.
• Non sempre consentito per i pazienti con malattia polmonare.

Chi mostra l'analisi?

Molto spesso, tale analisi è assegnata:

• • Se i risultati del Mantoux hanno dato dati dubbi, il sangue viene prelevato da una vena per tubercolosi.
  • Il paziente ha avuto contatti con una persona infetta, ma una visita medica non ha aiutato a determinare la diagnosi corretta.

• Durante un'operazione di emergenza, in cui è necessario conoscere nel più breve tempo possibile se il paziente è infetto.
• Durante la gravidanza, quando altri metodi diagnostici non possono fornire un risultato accurato senza danni al feto.

Dopo aver esaminato tutti i vantaggi e gli svantaggi della diagnosi di tbc, possiamo concludere che è meglio usare diversi metodi diagnostici contemporaneamente per fare una diagnosi accurata. Ciò contribuirà a garantire l'esistenza di un'infezione nel corpo e in quale stadio di progressione si trova. Avendo correttamente definito la diagnosi, sarà possibile iniziare un trattamento conservativo rapido e salvare una persona dalla morte.

Diagnosi PCR della tubercolosi

La tubercolosi è un'infezione specifica, la sua attenzione può essere presente nei tessuti umani per anni e quindi diffondersi per diversi mesi. Questa è una malattia cronica i cui regimi terapeutici ottimali sono difficili da selezionare. Uno dei motivi di ciò è la diagnosi tardiva, quando i micobatteri, mentre nel corpo umano, si sono già adattati a molti farmaci.

Quali sono i moderni metodi di diagnosi? Diagnostica PCR - che cos'è? Come viene condotta questa ricerca? In quali casi viene diagnosticata la tubercolosi con questo metodo e qual è la sua essenza?

Che cos'è la diagnostica PCR

Questo è uno dei metodi più moderni per diagnosticare non solo le malattie, ma anche il rilevamento di materiale biologico. La diagnostica della PCR è stata inventata relativamente di recente. Circa 30 anni fa, nel 1983, un biochimico americano, Carey Banks Mullis, propose un complesso schema di recupero per il materiale biologico di microrganismi in un segmento breve. Grazie alla sua scoperta, lo scienziato ha ricevuto il premio più alto - il premio Nobel.

Che cos'è - diagnosi di PCR delle infezioni? La reazione a catena della polimerasi (PCR) è una diagnosi del rilevamento di malattie virali, basata su metodi di ingegneria genetica. È ampiamente usato in microbiologia medica, immunologia e virologia. Il metodo è universale e aiuta a fare una diagnosi con una piccola quantità di materiale. Un'infezione può essere rilevata letteralmente nelle prime ore di infezione, molto prima che compaiano i primi sintomi della malattia.

Il metodo consiste nell'ottenere dal materiale di una persona malata non il patogeno stesso, ma frammenti del genoma (particelle di DNA), la sua biosintesi con successiva determinazione a quale classe di microrganismi il materiale genetico ottenuto appartiene mediante metodi genetici molecolari.

Nonostante il fatto che si tratti di un processo complesso, ci vuole molto meno tempo rispetto a molti metodi biologici per rilevare agenti infettivi. Entro poche ore, un microrganismo può essere rilevato mediante PCR. Per fare questo, non è necessario isolarlo dall'ambiente (sangue, liquido cerebrospinale, espettorato) e farlo crescere a lungo sui terreni di coltura artificiale. È sufficiente che un piccolo frammento del filamento di DNA dell'agente infettivo sia presente nel materiale in esame.

La base della reazione è la possibilità in condizioni artificiali (in vitro) di creare la sintesi di molecole di acido nucleico dell'agente infettivo.

Cosa è necessario per la PCR?

1. I primer sono i segmenti di DNA da cui inizia la biosintesi o la creazione.
2. Nucleotidi o composti complessi che sono alla base di una molecola di DNA o RNA.
3. La reazione a catena della polimerasi è impossibile senza la presenza di polimerasi, che è un enzima che accelera la PCR.

Le fasi della diagnostica PCR

Come viene condotta la diagnosi molecolare mediante PCR? La procedura è semplice e richiede poco tempo, tenendo conto della raccolta di materiale.

1. Prima di iniziare lo studio, prendono il materiale biologico necessario - questo è l'acqua di lavaggio bronchiale, il sangue, il contenuto gastrico, l'espettorato. Il tipo di materiale biologico dipende dal presunto agente patogeno.
2. Denaturazione o distruzione della struttura primaria del DNA, che consiste in due catene. L'essenza di questo stadio è di separare i due circuiti sotto l'influenza della temperatura elevata (il massimo è 98 ºC, che non dura più di due minuti).
3. Nella fase successiva della PCR, chiamata ricottura, la temperatura viene ridotta di diversi gradi in modo che il primer si leghi al filamento del DNA.
4. Allungamento, durante il quale la sintesi delle molecole desiderate avviene direttamente.

Di conseguenza, solo 25-30 di questi cicli ricevono il numero necessario di copie del DNA del microrganismo, che sono facilmente riconoscibili.

La PCR richiede la diagnosi di tubercolosi?

Non è possibile che tutte le persone con sospetta tubercolosi eseguano la PCR, poiché il metodo richiede attrezzature costose. Non tutte le cliniche pubbliche possono permettersi di comprarlo. Inoltre, è successo che anche i soliti metodi di diagnosi di un'infezione nella maggior parte dei casi si giustificano da soli.

Questi includono:

• indagine paziente, presa della storia;
• esame completo della persona;
• uno studio che utilizza il test alla tubercolina di Mantoux;
• radiografia o fluorografia;
• diagnostica del computer, se necessario;
• metodi di ricerca microbiologica: microscopia a striscio ed esame batteriologico dell'espettorato.

La PCR per tubercolosi viene eseguita in casi particolari quando è difficile fare una diagnosi o non è possibile eseguire altri metodi strumentali.

Nonostante l'abbondanza di metodi diagnostici, l'incidenza della tubercolosi continua a crescere. Attualmente, non c'è solo la sua crescita, ma anche altre caratteristiche:

• la malattia si presenta spesso in forma grave;
• il numero di casi fatali aumenta;
• sempre più resistenti alla moderna chemioterapia sono forme diagnosticate della malattia.

La riluttanza delle persone stesse a sottoporsi annualmente ad esami medici di routine, il rifiuto della vaccinazione porta alla diffusione della tubercolosi. In tali condizioni, abbiamo bisogno di metodi di ricerca rapidi, informativi ed efficaci che dovrebbero essere accessibili a bambini e adulti. Tutti i metodi diagnostici sopra riportati sono molto inferiori alla PCR.

Benefici della diagnosi di tubercolosi con PCR

Questa ricerca, anche se nuova, si è dimostrata efficace, specialmente in casi controversi in cui è impossibile fare una diagnosi per una serie di motivi.

Grazie alla PCR, è molto più facile rilevare l'agente eziologico della tubercolosi nel materiale di prova.

I vantaggi della diagnostica PCR sono i seguenti.

1. Questa è una rapida analisi. Un piccolo frammento della molecola del DNA può essere utilizzato per diagnosticare in poche ore (circa cinque), che viene utilizzato con successo in situazioni di emergenza quando, ad esempio, prima di un'operazione è necessario determinare se una persona è malata di tubercolosi.
2. L'analisi PCR è consentita nel caso in cui altri metodi non siano disponibili o vietati (per la rilevazione della tubercolosi polmonare, a volte è necessario prendere diverse immagini radiografiche, che saranno una grande dose di radiazioni).
3. Con l'aiuto della PCR, qualsiasi ambiente biologico viene esaminato per la presenza di un agente patogeno in esso. Ad esempio, è possibile condurre uno studio sul liquido cerebrospinale, se vi è il sospetto di meningite tubercolare.
4. Diagnosi PCR consentita di malattie infettive nei bambini, perché il metodo è sicuro.
5. Ti consente di identificare l'agente patogeno in qualsiasi fase della malattia.
6. L'elevata sensibilità della PCR consente di rilevare il Mycobacterium tuberculosis, anche se nel materiale biologico sono presenti solo pochi microrganismi.
7. È bene effettuare per la diagnosi di recidiva della malattia.

Dopo tutto la PCR letta sembra un metodo diagnostico quasi perfetto, che dovrebbe rendere tutti sospettati di tubercolosi. Ma ci sono anche degli svantaggi qui, devono essere presi in considerazione.

Svantaggi della PCR nella diagnosi di tubercolosi

Nel nostro tempo, tale diagnostica è più rara della regolarità. E per questo c'è una ragione.

1. Questo è un metodo di ricerca costoso. In molte cliniche, l'attrezzatura per la PCR è assente a causa del suo alto costo, ma l'analisi può essere ancora eseguita in laboratori pagati.
2. Immediatamente dopo il trattamento, nel corpo umano possono ancora essere presenti micobatteri morti o che vivono in piccole quantità (il risultato sarà positivo durante la diagnostica PCR), quindi il metodo sarà inaffidabile in questo momento, non ha senso eseguirlo.
3. Le mutazioni dei micobatteri si traducono in PCR inefficace - una normale sequenza di filamenti di DNA non può essere sintetizzata.
4. È necessario scegliere l'ambiente giusto per lo studio, il sangue viene prelevato solo se si sospetta di essere infetto (sepsi), non è necessario prendere l'espettorato se c'è una questione di tubercolosi degli organi del sistema nervoso. In questo caso, la PCR non sarà in grado di rilevare l'agente patogeno e la diagnosi sarà poco informativa.

Indicazioni per la rilevazione della tubercolosi mediante analisi PCR

La diagnosi di PCR della tubercolosi viene eseguita più spesso in casi controversi. Quando i medici riferiscono questo studio?

1. Se è difficile fare una diagnosi usando i soliti metodi disponibili, ma c'è stato un contatto con un paziente affetto da tubercolosi.
2. Nel caso in cui una persona non possa essere consegnata a una clinica per sottoporsi a test di routine per la tubercolosi, è più facile esaminarla utilizzando la PCR, poiché l'espettorato per il test può essere consegnato in un barattolo e la diagnosi viene confermata entro poche ore.
3. Se una persona sta per avere un'operazione di emergenza ed è urgente scoprire se è malato di tubercolosi.
4. Se necessario, una donna incinta è anche meglio esaminare la tubercolosi mediante PCR, poiché il metodo è sicuro.
5. Su base retribuita, chiunque non sia stato diagnosticato la tubercolosi è stato confermato utilizzando metodi batteriologici e fluoroscopia. Questo accade quando la lesione nei polmoni è impercettibile nell'immagine diretta e la persona durante l'espettorato per lo studio non può seguire le raccomandazioni per la corretta raccolta del materiale. In questo caso, la persona è preoccupata per tutti i sintomi caratteristici della tubercolosi polmonare.
6. Quando ci sono dubbi sui risultati del test di Mantoux.
7. È preferibile fare diagnosi di PCR della tubercolosi nei bambini. La procedura è sicura, non crea ulteriore esposizione alle radiazioni ed è efficace nel rilevare forme difficili da diagnosticare della malattia.

La diagnosi tempestiva della tubercolosi è la chiave per un trattamento adeguatamente prescritto e per ridurre la diffusione della malattia. Spesso, i metodi familiari di rilevamento della malattia non sono sempre efficaci. Pertanto, la PCR oggi è uno dei metodi più affidabili e sicuri per rilevare l'infezione nelle prime fasi del suo sviluppo.