Dove eseguire il test quantitativo per la tubercolosi

Antrite

Oggi esiste un'alternativa al tradizionale Mantoux e Diaskintest (dst) - questo è un test quantificante (noto anche come interferone) in vitro. Tutti e tre i metodi aiutano a rilevare la tubercolosi nelle fasi iniziali.

Il metodo del test quantifirone è migrato da paesi in cui l'incidenza della tubercolosi è molto più bassa (Europa, Stati Uniti, Australia). Gli scienziati stanno lavorando sulla possibilità di sostituire la diagnostica tradizionale con questo test.

Ci sono dispute su questo, poiché alcuni credono che sia impossibile abolire il sistema di ricerca, che per lungo tempo ha prodotto risultati positivi.

I loro avversari dimostrano l'estrema oggettività di tale test e la possibilità del suo utilizzo anche a persone con reazioni allergiche alla tubercolina.

Ora il metodo non può essere definito prevalente, ma esiste come soluzione alternativa.

Questa innovazione è stata particolarmente utile per le persone che sono controindicate a fare manta o dst, così come per i bambini durante il periodo di quarantena.

Qual è la differenza tra il test quantitativo per la tubercolosi e l'invitro dagli altri due metodi diagnostici?

Tali differenze tra il test e manta e dst possono essere distinte: quando il test quantificante non viene somministrato iniezioni sottocutanee, usano sangue venoso prelevato (per ulteriori test sulla quantità di gamma interferone), mentre altri metodi utilizzano iniezioni sottocutanee, che preclude il loro uso in malattie o immunità indebolita.

Dal momento che nel primo caso non c'è contatto con il corpo, non ci sono effetti collaterali, nel secondo ci possono essere reazioni collaterali se la persona non tollera la sostanza iniettata.

Non può essere vietato il test del quantiferone, poiché non viene eseguito direttamente nel corpo, la manta e il dst possono essere vietati in caso di malattie croniche o riacutizzazioni.

Quando si esegue dst e test invitro non vi è alcuna reazione a BCG e quando manta è una reazione agli anticorpi dopo BCG.

Lo schema del test quantiferico in invitro è il seguente: il paziente fornisce la quantità necessaria di sangue venoso in punti appositamente organizzati. Allo stesso tempo, il sangue può essere assunto solo se la persona non ha mangiato per otto ore.

Quindi il sangue viene posto in tre tubi e l'analisi è finalizzata alla scansione della presenza nel sangue dell'interferone gamma, che viene prodotto solo in persone che si ammalano di tubercolosi.

L'interferone gamma viene secreto dai linfociti T quando i microbi vengono rilevati nella tubercolosi.

Invitro è in grado di identificare le proteine ​​presenti nei microbatteri della tubercolosi di due tipi: umano e bovino, poiché producono anticorpi.

Questo è il modo in cui uno studio oggettivo della presenza dell'agente causativo della tubercolosi nel corpo avviene attraverso la scansione dell'interferone gamma nel sangue.

Inoltre, nel caso di un risultato positivo quando si passa il test, è necessario lavorare sulla differenziazione dei risultati

Ha lo scopo di distinguere tra patogeni di tubercolosi e altre micobatteriosi che possono essere rilevati durante l'analisi.

Durante il test in vitro ripetuto, è stato rilevato che un terzo dei pazienti ha un micobatterio nel sangue. Nonostante questo, la tubercolosi può svilupparsi solo nel 5-9% delle persone.

I seguenti fattori moltiplicano il rischio di sviluppare la malattia:

  1. Contatto con le persone che possiedono la forma aperta della tubercolosi (il più delle volte si tratta di medici o parenti).
  2. Immunità debole (include persone infette da HIV, diabetiche o fuori dal carcere).

Il test quantificogeno può essere assegnato nei seguenti casi:

  1. Se Mantau ha dato un risultato positivo.
  2. Se il paziente ha avuto contatti con un paziente affetto da tubercolosi.
  3. Se c'è un alto rischio di contatto con l'agente patogeno.
  4. Se il paziente ha controindicazioni alla diagnosi tradizionale di tubercolina o dst.
  5. Nel caso di un sondaggio sui migranti.

I vantaggi dell'impasto Quantiferon rispetto a dst e manta:

  • Nessun effetto collaterale Ciò è dovuto al fatto che l'analisi viene effettuata direttamente dopo il campionamento;
  • Alta specificità I risultati del test non possono essere falsi positivi.
  • Nessuna restrizione in azienda. Il test dei quantiferon può essere eseguito anche con l'insorgenza di malattie virali acute o immediatamente dopo la vaccinazione;
  • Obiettività dei risultati Con questo metodo di ricerca, i risultati sono ottenuti con metodi di laboratorio, che è un ordine di grandezza più obiettivo che con l'analisi visiva di campioni di pelle;
  • La capacità di applicare alle persone che hanno reazioni allergiche alla tubercolina o controindicazioni agli esami cutanei;

Come in ogni metodo di analisi, in quantificare il test in Invidro ha i suoi svantaggi.

Tra questi: lo studio (rispetto a manta e dst) è costoso; può mostrare un risultato falso negativo, poiché ha una sensibilità media; incapacità di determinare la forma latente della tubercolosi nel corpo o direttamente l'infiammazione.

Un problema separato è la non proliferazione di articoli in cui tale test è possibile.

Ad esempio, in Russia, i centri si trovano solo nelle città più grandi (Mosca, San Pietroburgo, Novosibirsk), il che complica inequivocabilmente l'accesso a questo tipo di ricerca.

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Test di tubercolosi

In questo articolo parleremo di quali test passare per la tubercolosi, al fine di escludere o confermare questa malattia. Vi diremo se è possibile determinare la tubercolosi con un esame del sangue, quali tipi di studi esistono, quale di essi è il più accurato e quali test per la tubercolosi sono utilizzati nei bambini e negli adulti. Parliamo anche di cambiamenti nei test comuni e di routine che possono causare sospetti di infezione e che richiedono una diagnosi più approfondita.

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La diagnostica della tubercolina, il test di Mantoux e il test del diaskin saranno dedicati a articoli separati.

Rilevazione di Mycobacterium Tuberculosis

Il compito principale della diagnosi della tubercolosi è identificare il suo agente causale. Diverse abbreviazioni possono essere indicate nella direzione:

  • BK (BK) - bacillo di Koch;
  • MBT, Mycobacterium tuberculosis;
  • KUM - micobatteri resistenti agli acidi;
  • KUB - batteri resistenti agli acidi

Queste abbreviazioni indicano la stessa cosa: il materiale biologico (ad esempio l'espettorato) deve essere analizzato per rilevare gli agenti causali della malattia.

Analisi dell'espettorato: regole di raccolta, trascrizione

Attrezzature da laboratorio per l'analisi dell'espettorato

La ricerca principale per l'individuazione di forme aperte di infezione è l'analisi dell'espettorato per BC (KUM, CUB). Per trasmetterlo correttamente, devi conoscere alcune regole:

  • La raccolta dell'espettorato viene effettuata in contenitori di plastica usa e getta o in barattoli di vetro con coperchio a chiusura ermetica (tali contenitori possono essere usati ripetutamente dopo la disinfezione). I piatti per la raccolta dell'espettorato hanno un collo largo.
  • La flemma viene raccolta in una stanza separata di una clinica o di un ospedale, il più lontano possibile da altre persone. Durante la sua dimissione, il paziente ha un rischio molto alto di infettare altri.
  • La ricerca richiede almeno 3 campioni. Il primo di questi viene assunto immediatamente dopo il trattamento, per il secondo viene somministrato un sondino per la raccolta giornaliera dell'espettorato; il terzo viene assunto il secondo giorno quando il paziente torna dal medico.
  • In ospedale per il primo giorno, prendere 2 campioni di espettorato con un intervallo di 2 ore; dopo di che, al paziente vengono dati i piatti in modo da raccogliere l'espettorato del mattino.
  • Prima di espettorare l'espettorato, fai qualche respiro profondo.
  • La raccolta dell'espettorato viene effettuata in presenza di un'infermiera.
  • L'esame dell'espettorato è necessario non solo per diagnosticare la tubercolosi, ma anche per determinare la resistenza ai farmaci dell'agente patogeno.

Interpretazione dell'analisi dell'espettorato

Dopo il fissaggio e la colorazione dell'espettorato, un tecnico di laboratorio lo osserva al microscopio e conta il numero di micobatteri rilevati. Se almeno 300 o meno micobatteri resistenti agli acidi si trovano in almeno 300 campi di vista, allora la malattia è considerata non confermata, e nella forma di analisi che scrivono "MBT (BK, KUM, ecc.) Non sono stati trovati."

  • Se da 4 a 9 microrganismi si trovano in 300 campi di vista, il risultato è considerato non sufficientemente positivo, cioè dubbia e registrato come il rapporto tra microbi trovato al numero di campi visivi visualizzati (ad esempio 5/300), mentre la reazione complessiva è stimata in 1+.
  • Se il tecnico ha esaminato 100 campi visivi e vede che ci sono almeno 10 agenti patogeni in totale, inserisce il risultato 1+.
  • Se ci sono fino a 10 batteri in ogni campo visivo, puoi vedere solo 50 campi e mettere 2+.
  • Infine, se ci sono molti micobatteri, ce ne sono più di 10 in ciascun campo visivo, quindi vengono visualizzati almeno 20 campi e 3+ sono impostati. Questa è la forma più contagiosa della malattia.

Ulteriori caratteristiche dell'espettorato per l'infezione da tubercolosi (non specifico, possono essere osservate in altre malattie):

  • la consistenza è viscosa;
  • il colore è più spesso bianco, ci possono essere "macchie di riso", così come strisce di sangue;
  • la quantità al giorno è 100 - 300 ml.

Ricerca altro materiale

I seguenti materiali biologici possono essere utilizzati:

Questo metodo può essere utilizzato in assenza di espettorato ben separato. L'assistente di laboratorio indossa una maschera medica, occhiali protettivi e indumenti medici chiusi. Il paziente apre la bocca, la sua lingua viene tirata in avanti con una pinzetta. Allo stesso tempo, un tampone sterile viene inserito nella superficie posteriore dell'orofaringe, più vicino alla laringe. Se il muro delle vie respiratorie è irritato, si verifica una tosse riflessa durante la quale il materiale viene raccolto.

  • Fluido per il lavaggio bronchiale

Il metodo è più accurato dell'analisi dell'espettorato. Tuttavia, non può essere utilizzato nell'insufficienza respiratoria o cardiaca, nelle persone con asma e anche con grande cautela negli anziani. Le vie aeree sono anestetizzate con uno spray anestetico. Usando una siringa speciale, 20 ml di soluzione salina sterile calda vengono iniettati nella laringe del paziente. Questa tecnica migliora la secrezione bronchiale e favorisce la secrezione di espettorato. Il paziente si schiarisce la gola e il liquido risultante viene inviato al laboratorio. Quando si semina l'acqua di lavaggio, la frequenza di rilevamento degli agenti infettivi aumenta del 20%.

  • Liquido di lavaggio gastrico

L'esame è usato nei bambini che non sanno come tossire, così come negli adulti con una piccola quantità di espettorato. Il paziente a stomaco vuoto beve un bicchiere di acqua bollita. Quindi una sonda (tubo sottile) viene introdotta nello stomaco e il contenuto viene aspirato con una siringa. Il metodo è abbastanza informativo, non solo per l'infezione da tubercolosi polmonare, ma anche per le lesioni di altri organi.

Il liquido spinale viene esaminato per sospetta meningite tubercolare (infiammazione delle meningi). Questa analisi dovrebbe essere effettuata nei primi giorni della malattia. Il medico fa una puntura con un ago sterile nella spina dorsale e raccoglie il flusso di liquido. Allo stesso tempo, uno specialista osserva la velocità di deflusso: se il liquido cerebrospinale scorre in un flusso, ciò indica un pericoloso aumento della pressione intracranica. Il liquido cerebrospinale viene raccolto in due tubi. Uno è lasciato nel frigorifero e dopo 12-24 ore, il film aracnoideo formato dai micobatteri diventa visibile. Il materiale dell'altro tubo viene esaminato in laboratorio.

In caso di diagnosi non chiara, la broncoscopia viene utilizzata per rilevare i micobatteri. Questa è un'ispezione della superficie interna dei bronchi usando uno strumento a fibra ottica. Durante lo studio, il medico prende un pezzo di tessuto dal muro del bronco (biopsia). Una piccola quantità di soluzione salina viene versata anche nei bronchi e il liquido risultante viene aspirato. Questo studio è condotto in caso di sospetta tubercolosi e assenza di escreato KUM in tre test - micobatteri resistenti agli acidi.

  • Analisi del liquido pleurico

Quando l'infezione tubercolare è spesso nella cavità intorno ai polmoni si accumula il liquido, che può contenere micobatteri. Per qualsiasi versamento pleurico, è necessario determinare la causa di questa condizione. Più fluido viene ricevuto, maggiore è la probabilità di rilevare i micobatteri in esso contenuti.

  • Biopsia pleurica e polmonare

Questi studi sono eseguiti in ospedale da personale appositamente formato. La loro essenza - nell'ottenere campioni di tessuto usando un ago speciale. Una biopsia polmonare può anche essere eseguita durante l'intervento chirurgico su questo organo.

Modi per studiare il materiale ottenuto

Il rilevamento dei micobatteri è il metodo principale per diagnosticare una malattia. Le analisi per il rilevamento della tubercolosi sono divise in 3 gruppi:

  1. Microbiologico: batterioscopico (colorante secondo Zil-Nielsen e colorazione con fluorocromi (coloranti luminosi)) e coltura (materiale vegetale su un mezzo nutritivo denso o liquido).
  2. Biologico (infezione con materiale da cavie malate).
  3. Genetica molecolare (reazione a catena della polimerasi - PCR, reazione a catena della ligasi - LCR).

Nel laboratorio, espettorato o altro materiale viene sottoposto a microscopia. Gli assistenti di laboratorio preparano uno striscio, che è colorato con tinture speciali, e lo studia al microscopio. Con un gran numero di microbatteri, sono chiaramente visibili.

Mycobacterium nell'espettorato

Migliora l'accuratezza diagnostica del metodo di coltura - piantare materiale su un mezzo nutritivo. Anche un piccolo numero di batteri, una volta in condizioni favorevoli, inizia a moltiplicarsi, formando cluster - colonie. Quindi i campioni ottenuti vengono studiati al microscopio e in altri modi. Analisi accurata della tubercolosi - uno studio di coltura, cioè la semina su un mezzo nutritivo. La durata di questo esame raggiunge 2,5 mesi. Se durante questo periodo le colonie di micobatterio non si sono formate sul mezzo nutritivo, significa che non c'era alcun agente patogeno nel materiale patogeno. L'analisi più accurata è biologica, cioè infezione da cavie da laboratorio.

Rapida analisi della tubercolosi e uno dei più accurati è il metodo PCR (polymerase chain reaction). La sua essenza è la rilevazione nell'espettorato di frammenti genetici specifici per i patogeni della tubercolosi. Tale studio richiede non più di 6 ore e consente di rilevare l'agente patogeno anche con la sua quantità insignificante. Tuttavia, la PCR rimane solo un metodo diagnostico aggiuntivo. I suoi risultati sono presi in considerazione contemporaneamente ad altri dati, valutazione dell'efficacia del trattamento e così via. Solo i dati della PCR per rilevare l'infezione non possono essere guidati.

La PCR positiva con uno studio di coltura negativo è stata osservata nel 50% delle persone che hanno contattato i batteri nella vita di tutti i giorni (trasporto pubblico, ecc.) E nell'80% delle persone che hanno la tubercolosi era latente, senza cambiamenti radiologici nei polmoni e non è stata diagnosticata. Pertanto, i pazienti a rischio con una forma subclinica della malattia possono essere rilevati. In condizioni sfavorevoli, tali persone possono attivare i micobatteri e causare una malattia attiva.

Test sierologici

Il test sierologico del sangue per la tubercolosi non fornisce informazioni diagnostiche accurate, quindi in pratica è di scarsa importanza, sebbene gli esperti siano costantemente alla ricerca di modi per diagnosticare rapidamente questa malattia (in particolare le forme extrapolmonari).

Un esame del sangue per gli anticorpi dell'agente causale della tubercolosi si basa sull'identificazione delle proteine ​​immunitarie a questo microrganismo. Esistono 2 metodi principali per la rilevazione delle immunoglobuline contro i micobatteri resistenti agli acidi:

  • la diagnosi di tubercolina (reazione di Mantoux) ha mantenuto il suo valore solo nei bambini e negli adolescenti; negli adulti, non consente di distinguere lo stato dell'infezione e della malattia;
  • analisi della tubercolosi invece di Mantoux - ELISA, o immunodosaggio; basato sulla rilevazione di anticorpi in materiale biologico; utilizzato solo per lo screening (screening rapido di massa) e la selezione del paziente per uno screening più dettagliato.

Prove generali di sangue e urine, biochimica del sangue

La tubercolosi completa del sangue non mostra. Tuttavia, con questa malattia, possono essere identificate alcune anomalie che possono suggerire una malattia:

  • una lieve diminuzione del numero di eritrociti e dell'emoglobina può essere un segno di emorragia intestinale o polmonare, nonché una forma fibro-cavernosa della malattia;
  • un aumento del numero di neutrofili stab (spostamento della formula a sinistra, fino al 20% delle forme di stab), oltre all'assenza di eosinofili e una diminuzione del numero di linfociti e monociti;
  • Aumento di ESR fino a 40 - 80 mm / h.

L'analisi delle urine di solito non cambia. Nell'analisi biochimica del sangue nella tubercolosi polmonare può essere identificato:

  • livelli ridotti di proteine ​​totali e albumina;
  • diminuzione del livello di sodio nel siero;
  • aumento di ALT, AST;
  • un leggero aumento dei livelli di calcio nel sangue.

Test CLINISPOT-TB

Questa è l'analisi più avanzata per la tubercolosi. È anche chiamato T-Spot. L'essenza del test:

  • in presenza di micobatteri nel corpo, il sistema immunitario reagisce a loro;
  • questa reazione consiste nel rilascio di interferone gamma da parte di alcuni linfociti T;
  • L'essenza del test è determinare il numero di tali linfociti attivati.

L'analisi spot consente di identificare i batteri, anche in quantità molto piccole. Viene utilizzato per identificare forme latenti e nascoste della malattia e per diagnosticare la patologia nelle persone con un'immunità depressa (ad esempio, sullo sfondo dell'AIDS). Il test è altamente specifico, i risultati falsamente positivi non vengono praticamente osservati. Ciò significa che un risultato positivo quasi al 100% indica la presenza di tubercolosi.

La sensibilità, cioè la capacità di rilevare un'infezione, nell'analisi SPOT raggiunge il 96%, anche nelle forme extrapolmonari della malattia. Per confronto, la sensibilità della reazione di Mantoux è inferiore al 70%. T-SPOT è disponibile nel Regno Unito.

Il test QuantiFERON-TB Gold in-tube è un altro metodo moderno per rilevare la tubercolosi nel sangue. Come T-SPOT, viene utilizzato ad alto rischio di infezione (ad esempio, vivendo nella famiglia del paziente) in combinazione con un test Mantoux negativo. Fatto un tale sistema di test in Australia.

Ci sono test per il rilevamento rapido simultaneo di tubercolosi e la sua resistenza patogeno alla rifampicina e rifampicina + isoniazide. Sono usati nei grandi centri di tubercolosi. Questi sono INNO-LiPA Rif, kit TB e GenoType MTBDRplus. Tuttavia, non possono essere utilizzati per confermare la diagnosi della malattia.

Quanto costano i test per la tubercolosi

Di seguito forniamo una tabella in cui indichiamo il costo degli studi più popolari nei laboratori di rete.

Metodi per testare il sangue per la PCR della tubercolosi

L'agente eziologico della tubercolosi è un micobatterio chiamato bacillo della tubercolosi o bacillo di Koch. Una volta nel corpo umano, potrebbe non manifestarsi per molto tempo. Ma nel tempo, non appena si presentano condizioni favorevoli, il batterio può causare tubercolosi polmonare o altri organi.

Per combattere efficacemente questa malattia, è molto importante diagnosticarlo nelle sue fasi iniziali. Un esame del sangue per la tubercolosi mediante PCR è il modo più efficace e più rapido per diagnosticare la tubercolosi. Ci vogliono quattro ore per condurlo. È più conveniente rispetto ad altri metodi, ha meno controindicazioni e precisione quasi al 100%.

Che cos'è un esame del sangue della PCR?

Oggi l'analisi della PCR è uno dei metodi più recenti per diagnosticare varie malattie del corpo. Per il rilevamento della tubercolosi, questo metodo è il più efficace rispetto ad altri metodi utilizzati finora. Il metodo fu scoperto nel 1983 dal famoso chimico K. Mulllis, che ricevette il Premio Nobel per lui dieci anni dopo.

La base di questo metodo è la reazione a catena della polimerasi, che consente di determinare non solo la presenza del patogeno nel sangue, ma anche il suo aspetto. A tale scopo, utilizzando il metodo PCR, viene rilevata una parte del DNA del patogeno e viene effettuata la sua identificazione. Anche se ci sono diversi agenti patogeni nel sangue, questa tecnica ti permette di individuarli tutti.

Un PCR per la tubercolosi viene prescritto al paziente in caso di sospetto di bacillo tubercolare, ma non viene rilevato con altri metodi.

Se lo si desidera, tutti possono passare questa analisi da soli, contattando la clinica in cui viene eseguita, ad esempio INVITRO. È una delle più grandi società private contenenti laboratori medici in molti paesi.

Questo metodo è efficace nella diagnosi della tubercolosi?

Attualmente, non esiste un'analisi più accurata per identificare i bastoncini Koch nel corpo del paziente. Il conteggio ematico completo è efficace, ma consente di ottenere un risultato positivo o negativo solo dopo un tempo sufficientemente lungo. Per fare questo, il materiale in studio viene seminato su un mezzo nutritivo e solo dopo alcune settimane diventa chiaro se i batteri si moltiplicano.

Il metodo PCR consente di rilevare il DNA dei batteri in poche ore, il che è un grande vantaggio per la diagnosi. Inoltre, l'analisi consente di identificare con precisione il batterio, anche se è molto piccolo nel sangue.

Controindicazioni al metodo

Questo metodo di ricerca non ha praticamente controindicazioni. A causa del fatto che il sangue è usato, le condizioni del paziente non contano. La presenza di raffreddori non influisce sul risultato dell'analisi.

Non è raccomandato effettuarlo dopo la vaccinazione, così come dopo il recente trattamento. Ciò è dovuto al fatto che il corpo non è ancora pulito e che i resti di batteri possono influenzare il risultato.

Benefici dell'analisi

Una PCR per il test del sangue per la tubercolosi ha diversi vantaggi rispetto ad altri metodi di esame, come il test di Mantoux o la radiografia. Tra questi ci sono le seguenti qualità:

  1. La velocità di esecuzione. Rispetto ad altre analisi PCR fatte in poche ore.
  2. Per la procedura, è possibile utilizzare non solo il sangue, ma anche altre secrezioni biologiche del corpo.
  3. La procedura non ha controindicazioni, può essere eseguita non solo per gli adulti ma anche per i bambini. Adatto anche per le donne incinte senza danni alla loro salute.
  4. Il metodo consente di rilevare l'infezione del sangue da batteri nelle primissime fasi, quando non ci sono segni esterni della malattia.
  5. La tecnica consente di identificare il patogeno con la più piccola quantità di batteri nel materiale.
  6. Dà un buon effetto nello studio del paziente, infettato di nuovo.
  7. L'analisi può essere presa indipendentemente da come si sente il paziente. Ad esempio, la reazione di Mantoux viene eseguita se il paziente non ha il raffreddore e la febbre. In questo caso, non ci sono tali restrizioni.

Come si può vedere dall'elenco fornito, questo metodo diagnostico è molto più preferibile rispetto ad altri. È completamente innocuo per i pazienti allergici. Può essere usato con successo da adulti e bambini. La tecnica consente di risparmiare tempo sulla diagnosi e iniziare il trattamento più velocemente.

Il metodo è anche conveniente per le persone di una provincia dove non ci sono laboratori pertinenti. Non devono venire più volte alla clinica, un giorno è sufficiente per ottenere il risultato di test e prescrizione di trattamento da un medico.

Svantaggi del test ematico PCR

Oltre ai vantaggi, questo metodo presenta una serie di svantaggi, che possono rappresentare un ostacolo per l'esecuzione dell'analisi PCR:

  1. Il costo elevato relativo della procedura. Effettuare un'analisi del genere richiede attrezzature costose e non tutte le cliniche possono permetterselo. È in grandi laboratori di aziende private. I prezzi lì, di regola, sono sempre alti.
  2. L'analisi fornisce il risultato corretto solo se il materiale per lo studio è selezionato correttamente. Ad esempio, nella tubercolosi del sistema genito-urinario, un esame del sangue non mostrerà la presenza della malattia. In questo caso, è necessario raccogliere l'urina o scaricare dagli organi urinari.
  3. Il metodo non sempre dà un risultato accurato nei bambini. Ciò è dovuto all'influenza delle vaccinazioni. Ad esempio, dopo la vaccinazione BCG, questa analisi non è raccomandata.
  4. Esiste la possibilità di ottenere un risultato falso positivo o falso negativo. Cos'è? Il metodo ha una sensibilità molto alta. Quando si raccoglie il materiale deve essere rispettata una maggiore sterilità. Se il materiale ottiene il minor numero di batteri estranei, l'analisi sarà danneggiata, il risultato sarà distorto.

Nonostante le carenze, il metodo è ampiamente utilizzato. Ad esempio, nei casi in cui è necessario determinare urgentemente la malattia in un paziente. Può essere prescritto per le donne incinte se sospettano un'infezione che potrebbe minacciare il bambino o la madre. A volte prescritto per i bambini prima di andare all'asilo. Ma questo è su richiesta dei genitori.

Preparazione per la procedura

Prima di eseguire l'analisi, il paziente deve svolgere attività preparatorie. Dipendono da quale materiale si arrenderanno:

  1. Se è necessario donare il sangue, deve essere preparato un tubo sterile. L'anticoagulante è aggiunto ad esso - una soluzione speciale che impedisce al sangue di coagulazione. Il materiale raccolto viene inserito e mescolato delicatamente. Il sangue viene raccolto con una siringa monouso da una vena.
  2. La procedura viene eseguita al mattino a stomaco vuoto. Il sangue viene conservato in frigorifero per non più di cinque ore. Se ignori questa regola, i risultati dell'analisi potrebbero essere imprecisi.
  3. Una settimana prima della consegna del biomateriale dovrebbe smettere di prendere qualsiasi farmaco.
  4. Non puoi donare il sangue dopo aver assunto bevande alcoliche.
  5. In presenza di malattie infettive o infiammatorie croniche, la procedura viene posticipata fino a quando la persona non si riprende completamente.

Durante la procedura è necessario osservare la massima sterilità. Pertanto, è importante superare i test solo in cliniche comprovate sotto la guida di uno specialista esperto. Va ricordato che l'ingresso minimo di microrganismi estranei può dare risultati errati. Per evitare questo, il medico può ordinare un riesame.

Come viene prelevato il sangue mediante PCR?

Per donare il sangue per l'analisi, il paziente non deve mangiare più di sei ore. È meglio sottoporsi alla procedura al mattino a stomaco vuoto. Il sangue viene prelevato dalla vena cubitale attraverso un ago monouso immediatamente in un tubo sterile. Viene iniettato un anticoagulante in modo che il sangue non si coaguli. Mescolare il contenuto del tubo dovrebbe essere attentamente, evitando movimenti improvvisi.

Se il sangue è stato prelevato al di fuori del laboratorio, dovrebbe essere immediatamente consegnato al tecnico. Per testare la tubercolosi, deve essere conservato per non più di cinque ore. Dopo questo tempo il risultato potrebbe essere impreciso. Il prelievo di materiale al di fuori del laboratorio è consentito solo se il paziente non può arrivare in ospedale per motivi di salute. Ad esempio, sta sdraiato e non c'è possibilità di assumere il trasporto appropriato.

Decodifica risultati

Il risultato della PCR può essere positivo o negativo. Positivo significa la presenza di batteri nel corpo. Negativo indica che manca. Anche se non sempre un risultato positivo parla di tubercolosi. Potrebbe essere errato, quindi sono necessari ulteriori test diagnostici per confermare la diagnosi.

Tutte le altre informazioni sono difficili per la percezione del paziente ed è impegnata in uno specialista. Se un risultato positivo, il medico prescrive il trattamento necessario.

Costo delle prove in diversi centri

Il prezzo della procedura può variare a seconda del centro medico dove viene effettuato. Vedi la tabella qui sotto per i dettagli.

Esistono controindicazioni al test di Mantoux? Lo farà un'analisi PCR per la tubercolosi.

La tubercolosi è una malattia pericolosa che può essere trattata con successo con una diagnosi tempestiva.

Uno degli studi più istruttivi per identificare la malattia in una fase precoce è chiamato il metodo PCR (polymerase chain reaction).

L'analisi PCR non è solo la più informativa, ma anche uno degli studi più accessibili in grado di rilevare la tubercolosi nelle sue fasi iniziali.

Cos'è l'analisi PCR?

Tutti i microrganismi viventi, inclusi virus e batteri, contengono RNA e molecole di DNA nella loro struttura. Evidenziando questi acidi, è possibile dire con grande certezza quali agenti estranei sono presenti nel sangue umano e fare una diagnosi accurata.

L'essenza del metodo PCR è l'elaborazione speciale di campioni di fluidi biologici, in base al quale è possibile determinare a quali specie appartengono i microrganismi presenti.

Analisi della PCR per la tubercolosi: indicazioni, vantaggi e svantaggi

La tecnica PCR è utilizzata in persone con gravi lesioni polmonari in questi casi e manifestazioni respiratorie (tosse grave, emottisi), quando è impossibile diagnosticare accuratamente la malattia con sintomi clinici.

Si raccomanda di sottoporsi allo studio e dopo il contatto diretto con il corriere della malattia. I vantaggi che ha includono:

  • velocità di esecuzione - per ottenere un risultato, non è necessario coltivare una cultura dell'agente patogeno o eseguire altre procedure complesse;
  • altamente informativo: quando si diagnostica la tubercolosi, la precisione dell'analisi raggiunge il 90% e oltre;
  • alta sensibilità e specificità - per identificare i patogeni nel materiale può contenere solo una cellula del virus;
  • universalità - praticamente tutti i liquidi biologici sono adatti per l'analisi: espettorato, sangue, lave bronchiali.

Per confronto: l'accuratezza della microscopia degli strisci di espettorato, che viene utilizzata per rilevare la tubercolosi, è solo del 40-50% e con un basso numero di agenti patogeni è ridotta al 10% o meno. La coltura dell'espettorato è più informativa, ma occorrono da 2 a 8 settimane per ottenere risultati.

È possibile utilizzare la PCR per la tubercolosi invece di Mantoux, se la persona ha controindicazioni al campione.

Gli svantaggi della tecnica includono il rischio di ottenere un risultato falso-negativo. In altre parole, l'assenza di DNA specifico nell'espettorato, nel sangue o nelle urine non indica ancora l'assenza di tubercolosi in un paziente.

È importante Nella diagnosi di tubercolosi nei bambini, la sensibilità dell'analisi PCR è inferiore rispetto agli adulti e si aggira intorno al 25-83%.

Foto 1. Fare PCR anziché Mantoux a un bambino è una buona opzione se è allergico o spesso malato.

La procedura per l'analisi della PCR

La procedura per condurre l'analisi PCR viene effettuata per mezzo di un dispositivo speciale chiamato amplificatore e consiste di quattro fasi. Per lo studio sono necessarie sezioni di DNA da cui partono la sintesi di molecole, nucleotidi (basi di molecole di DNA), nonché polimerasi o un enzima che accelera la procedura.

  1. Raccolta di materiale biologico (espettorato, sangue, lavaggio bronchiale).
  2. Riscaldare il campione ad una temperatura di circa il 98% per distruggere la struttura primaria della catena del DNA.
  3. Ricottura o abbassamento della temperatura di alcuni gradi per legare il primer al filamento del DNA.
  4. Sintesi di molecole necessarie per produrre un risultato.

Dopo aver eseguito 25-30 di tali cicli, si forma un certo numero di copie del DNA dei virus, con cui è facile determinare l'agente eziologico della malattia.

Attenzione: l'analisi PCR non distingue i microrganismi "morti" da "viventi", quindi il risultato può essere positivo per un certo tempo dopo il trattamento.

Preparazione per l'analisi

Se si esegue un esame del sangue della PCR per la tubercolosi, non è necessario un addestramento speciale, ma i pazienti sono invitati a seguire le regole generali: astenersi da mangiare per almeno 8 ore, eliminare alcol e assumere farmaci, non fumare per un'ora prima di prendere il materiale.

L'espettorato viene raccolto al mattino dopo la spazzolatura e un accurato risciacquo della bocca.

Se l'essudato è scarsamente espulso, dovresti prendere un espettorante la sera prima o prendere l'inalazione. L'espettorato con muco, pus, macchie bianche o giallastre ha valore diagnostico.

Se non è possibile prendere l'espettorato per l'analisi, i tamponi di bronco vengono utilizzati per identificare i patogeni. Tale analisi non richiede preparazione e il materiale è preso come segue. Con l'aiuto di una siringa laringea, il paziente viene versato nella trachea una soluzione di cloruro di sodio, che provoca una forte tosse - tosse che viene utilizzata per la ricerca.

Attenzione. Il risultato dell'analisi distorce antibiotici, eparina e altri farmaci usati per il trattamento locale, quindi lo studio è raccomandato 10-14 giorni dopo la somministrazione.

Mycobacterium tuberculosis, determinazione del DNA (Mycobacterium tuberculosis, DNA) nel siero

Determinazione del DNA di patogeni della tubercolosi, complesso micobatterico: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum in siero mediante il metodo della reazione a catena della polimerasi (PCR) con rilevamento in "tempo reale".

Tubercolosi (dal latino Tuberculum - tubercolo) - una malattia umana comune, socialmente dipendente. Sono malati e animali. L'agente eziologico della tubercolosi fu scoperto da R. Koch nel 1882. Si tratta di batteri aerobici resistenti agli acidi (74 specie) del genere Mycobacterium, ampiamente distribuiti nel suolo, nell'acqua e negli animali. Nell'uomo, l'agente patogeno più comune è Mycobacterium tuberculosis. Il secondo più frequente è Mycobacterium bovis. Entrambe le specie sono molto resistenti a molti fattori ambientali e rimangono vitali nel corpo per un tempo molto lungo e possono causare malattie molti anni dopo l'infezione. È molto importante che il mycobacterium tuberculosis possa formare le cosiddette forme a L. Persistendo nel corpo, creano un'immunità alla tubercolosi.

Per lungo tempo, la tubercolosi può verificarsi in modo latente e può essere rilevata per caso, sebbene spesso si manifestino sintomi come debolezza, affaticamento, febbre di basso grado, sudorazione notturna e anemia e leucopenia. Attualmente, nonostante tutti i risultati della terapia antimicrobica, la tubercolosi minaccia il futuro della nazione. Pertanto, tutti i metodi diagnostici, in particolare le sue forme latenti sono estremamente importanti.

Esistono molti metodi di diagnosi di laboratorio della tubercolosi: microscopia a striscio (il più spesso usato per questo espettorato), il metodo di coltura classica, ELISA. Hanno tutti dei vantaggi, ma anche certi svantaggi, in particolare, il rilevamento dei micobatteri solo nel caso di un numero sufficiente di essi.

Negli ultimi anni, la reazione a catena della polimerasi (PCR) è stata utilizzata per la diagnosi. La sua elevata sensibilità consente di rilevare singole cellule e persino frammenti di DNA nel materiale in esame. Il metodo elimina le reazioni incrociate e la specificità raggiunge il 100%. La PCR consente la differenziazione di forme limitate e disseminate di tubercolosi, specialmente nei bambini, anche con risultati negativi di studi microbiologici.

  • frammento rilevabile - parti specifiche del DNA micobatterico;
  • specificità di determinazione - 100%;
  • La sensibilità di rilevamento è di 100 copie di DNA micobatterico in un campione.

letteratura

  1. Makarevich A.E. Malattie dell'apparato respiratorio - M. Higher School, 2000. - 368 p.
  2. Jacobs D. et al. Manuale di prova di laboratorio / Lexi-Comp./2002 - pp. 828 - 829.
  • Febbre caratterizzata da un doppio aumento quotidiano e una diminuzione della temperatura corporea. Sullo sfondo dell'ipersensibilità al tubercolinico o della tubercolina.
  • Malattie infiammatorie acute delle alte e basse vie respiratorie con contatto prolungato con un paziente tubercolare nella storia.
  • Reazione anormale a un test della tubercolina (ipersensibilità o anergia) sullo sfondo di esacerbazione di una malattia sistemica.
  • Lupus eritematoso sistemico sospetto.

L'interpretazione dei risultati della ricerca contiene informazioni per il medico curante e non è una diagnosi. Le informazioni in questa sezione non possono essere utilizzate per l'autodiagnosi e l'auto-trattamento. Una diagnosi accurata viene effettuata dal medico, utilizzando sia i risultati di questo esame sia le informazioni necessarie da altre fonti: anamnesi, risultati di altri esami, ecc.

Test di qualità Il risultato è dato in termini di "rilevato" o "non rilevato".

  • "Rilevato": frammenti di DNA specifici del micobatterio specifici per i micobatteri sono stati trovati nel campione da analizzare;
  • "Non rilevato": nel campione analizzato, frammenti di DNA specifici del micobatterio o la concentrazione del patogeno nel campione non sono stati trovati al di sotto del limite di sensibilità del test.
Si noti che i tempi degli studi sulla PCR possono essere aumentati quando si eseguono test di conferma.

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Analisi del sangue Invitro per la tubercolosi

Esame del sangue per tubercolosi a Invitro

È possibile ottenere un'analisi della tubercolosi mediante sangue in Invitro nel laboratorio più vicino a casa. Una visita al laboratorio è possibile previo accordo. Puoi familiarizzare con il prezzo dell'analisi, le peculiarità della sua implementazione e iscriverti anche per un giorno conveniente per te chiamando il numero di telefono indicato sul sito.

Puoi fare un'analisi del sangue nella direzione di un dottore. È possibile condurre uno studio senza referral del paziente.

La diagnosi di infezione e il rilevamento dei bastoncini di Koch viene effettuato con diversi metodi altamente informativi. La diagnosi mediante PCR consente di ottenere informazioni affidabili nelle prime fasi della malattia. Frammenti di DNA e RNA di microrganismi vengono rilevati nel siero del vettore mycobacterium diversi giorni dopo l'infezione. L'analisi diagnostica del siero consente di giudicare la forma e l'attività della malattia. Uno studio di reazione a catena della polimerasi viene utilizzato per monitorare l'efficacia di un trattamento antibiotico selezionato della malattia. Il metodo è usato per chiarire le forme extrapolmonari della malattia.

L'esame dell'espettorato avviene secondo le indicazioni. Lo studio è prescritto a pazienti con una malattia diagnosticata per determinare le forme aperte e chiuse. Per raccogliere espettorato, il paziente riceve una scatola di plastica sterile. Durante il giorno, il paziente gli infila un punto di tosse e lo porta in laboratorio. Utilizzando la ricerca determinare la presenza di micobatteri dell'espettorato.

In laboratorio, è possibile eseguire un'analisi clinica generale per determinare gli elementi del modulo. Nelle malattie infiammatorie e infettive dei polmoni è caratterizzata da leucocitosi, alto tasso di sedimentazione degli eritrociti ed eosinofilia a numeri elevati. Un aumento della formula leucocitaria di eosine indica una malattia dei polmoni di natura non infiammatoria. Di norma, la fase acuta dell'attività micobatterica nei polmoni provoca un aumento dell'ESR fino a 50 mm / h. e alta eosinofilia.

Un metodo di ricerca abbastanza informativo è lo studio della tensione immunologica contro gli antigeni micobatterici. La risposta immunitaria si sviluppa gradualmente, raggiungendo il massimo con il processo di attivazione nei polmoni. Lo studio permette di giudicare l'attività della fase, l'efficacia del trattamento con farmaci antibatterici.

Per passare l'esame in laboratorio in vitro è a disposizione di tutti, il costo degli studi clinici è determinato sulla base del listino prezzi in base alla complessità e all'urgenza.

Quantiferon test per tubercolosi in Invitro e Diaskintest: vantaggi e differenze

Se una persona ha sintomi di una malattia così pericolosa e intrattabile come la tubercolosi, è necessario applicare urgentemente al dispensario per condurre test diagnostici sul corpo. È altrettanto importante essere esaminati regolarmente in un dispensario di tubercolosi per le persone che sono state in contatto o che si prendono cura costantemente dei pazienti con tubercolosi aperta. Inoltre, dopo aver visitato un paese in cui l'incidenza dell'infezione e dei micobatteri è molto elevata, è necessario superare immediatamente i test appropriati per identificare l'agente patogeno nel corpo.

Attualmente, la tubercolosi polmonare o altri organi possono essere diagnosticati in vari modi. Ma il primo test è il test alla tubercolina di Mantoux, che in un paio di giorni può determinare se una persona è infetta da micobatteri o meno. Inoltre recentemente ha iniziato a utilizzare altri tipi di test: la ricerca Diaskintest e Quantiferon su Invitro. Considera come vengono effettuati e quali sono i loro vantaggi rispetto al test di Mantoux.

Diaskintest per la tubercolosi

In contrasto con il test della tubercolina, che reagisce alla vaccinazione BCG e un'infezione in vivo dei micobatteri, la sostanza Diaskin mostra un'infezione eccezionale e non una reazione allergica alla vaccinazione. Pertanto, Diaskintest deve essere eseguito nei casi in cui, dopo Mantoux, sia necessario separare l'allergia post vaccinazione dalla presenza del vero agente eziologico della tubercolosi.

Diasquin è un nuovo farmaco diagnostico allergenico che migliora la qualità della ricerca sul corpo dell'infezione da tubercolosi. Lo strumento contiene anticorpi presenti nei ceppi micobatterici patogeni, ma sono assenti nel vaccino BCG. A causa di ciò, la reazione allergica di Diaskintest si verifica solo in presenza di una vera infezione. Ma la preparazione non contiene patogeni della tubercolosi, quindi sarà impossibile prendere la malattia dopo un test allergico.

Se confrontiamo i campioni di Mantoux e Diaskintest, nel primo caso i micobatteri possono essere rilevati solo nel 50-70% dei casi. E il secondo test allergologico è più accurato, poiché trova l'agente eziologico della tubercolosi nel 90%. Non si può dire che Diaskin sostituirà il test alla tubercolina, dal momento che non può essere usato per determinare se il paziente ha bisogno di rivaccinazione BCG o meno.

Diaskintest è prescritto nelle seguenti situazioni:

  • Quando è necessario diagnosticare la tubercolosi e identificare il livello di attività del processo infiammatorio;
  • Distinguere l'infezione da micobatteri dai sintomi di altre malattie con manifestazioni simili;
  • Differenziare la reazione allergica al BCG dall'infiammazione al vero agente patogeno;
  • Osservare il processo di trattamento e la sua efficacia.

Diaskintest per tubercolosi è necessariamente eseguita nei casi in cui la curva di Mantoux sia presente in bambini o pazienti adulti. Ma è controindicato nei pazienti con tali malattie:

  • Infiammazioni acute o esacerbazioni di malattie croniche (ad eccezione dei sintomi simili allo sviluppo della tubercolosi);
  • Disturbi somatici;
  • Malattie della pelle;
  • le allergie;
  • Convulsioni epilettiche.

Dopo il passaggio dei processi infiammatori acuti, Diaskintest non è controindicato.

Diaskin è presentato allo stesso modo del test di Mantoux. Ma entrambi i test non si combinano in un solo periodo. Cioè, se la reazione alla tubercolina viene eseguita secondo il calendario, Diaskintest viene trasferito al mese successivo alla vaccinazione. Quando Mantoux viene iniettato in un avambraccio, un altro viene sicuramente usato per l'iniezione di Diaskin.

Il risultato stimato da Diaskintest dopo tre giorni. Se non ci sono arrossamenti e infiltrazioni nel sito di iniezione, il test è negativo. Non appena un papule di qualsiasi dimensione si forma sulla pelle e vi è iperemia, il test è positivo. La risposta a Diaskintest sarà assente in pazienti sani guariti da tubercolosi e infettati da micobatteri inattivi.

Diaskine sostituisce il test di Mantoux?

Diaskintest è una buona ripartizione della tubercolosi, ma da sola non può essere completamente informativo. Con il suo aiuto, è possibile isolare la maggior parte dei pazienti con la forma polmonare della malattia della bacchetta umana di Koch. Ma con altri tipi di micobatteri, il campione non sarà in grado di identificare l'agente eziologico della tubercolosi.

È importante notare che la forza della reazione del corpo a Diaskin non può parlare della gravità o del livello di attività dei bacilli, poiché l'allergia cutanea segna più la risposta del sistema immunitario agli anticorpi somministrati.

Inoltre, Diaskintest di solito non diagnostica un'infezione secondaria da tubercolosi, che di solito è causata da un ceppo bovino di micobatteri. Pertanto, anche con una brusca reazione da parte di Mantoux, un bambino o un adulto viene già inviato per il trattamento della tubercolosi, anche se non ha la tosse. Sebbene in questo caso Diaskintest possa essere negativo, la prima reazione alla tubercolina richiede particolare attenzione.

Attualmente, ci sono tre forme cliniche di tubercolosi:

A seconda del tipo di lesione, ogni test risponderà a modo suo.

Con l'introduzione dell'iniezione di Mantoux, tutte e tre le forme di tubercolosi provocheranno una reazione positiva da parte del paziente. Se Diaskintest viene eseguito, di solito è positivo per una malattia polmonare e negativo per altre due forme. Da ciò possiamo concludere che Mantu indicherà i micobatteri che infettano qualsiasi organo umano, anche se sono inattivi. E Diaskin rivelerà il vero bacillo della tubercolosi umana tra i pazienti con forme polmonari. Diaskintest non sostituisce il test di Mantoux, può solo essere il suo complemento.

Quantiferon test per la tubercolosi

Negli ultimi anni, molto spesso, insieme al test di Mantoux, si raccomanda di utilizzare un test per identificare i pazienti infetti da infezione tubercolare di varie specie. Il test quantificante viene eseguito al di fuori del corpo, quindi è completamente sicuro per le persone con immunità indebolita.

Un esame del sangue determina la presenza di gamma-interferone, che viene prodotto solo in pazienti con tubercolosi. Per condurre uno studio, il sangue venoso viene prelevato dal paziente. Una persona non dovrebbe mangiare cibo per otto ore prima di essere testata. Il campione raccolto viene posto in tre provette per escludere risultati falsi del test.

Se si confronta il test Quantiferon con Mantoux o Diaskintest, allora è più sensibile e aiuta a rilevare con precisione la presenza di infezione da tubercolosi. Ma allo stesso tempo, anche lui non risponde al vaccino BCG e dà un risultato negativo.

I vantaggi di determinare l'interferone gamma includono:

  • Test ad alta sensibilità;
  • Sicurezza, senza effetti collaterali;
  • Non risponde a BCG;
  • Non ci sono controindicazioni;
  • Valutazione dell'oggettività dei risultati del test.

Gli svantaggi dello studio Quantiferon comprendono il fatto che non consente di determinare se esiste una forma latente di tubercolosi o infiammazione attiva nel corpo umano.

È importante notare che il test di Invitro consente di sostituire la diagnosi di tubercolina. Ma al momento, l'accuratezza del risultato Quantiferon è dimostrata solo in studi di laboratorio, ma non testata nella pratica.

Invitro determina gli interferoni gamma, che sono prodotti nel corpo dai linfociti T solo dopo l'incontro con l'agente patogeno della tubercolosi. Proteine ​​specifiche vengono secrete al contatto, sia con la specie umana di micobatteri che con il bovino. Dopo che le cellule immunitarie riconoscono il bacillo tubercolare, producono anticorpi, che vengono rilevati nello studio del sangue venoso. Pertanto, il test Quantiferon rivela anche micobatteriosi. Pertanto, in caso di diagnosi positiva, si deve distinguere la presenza dell'agente causativo della tubercolosi da micobatteriosi.

Sondaggi su pazienti diversi hanno chiarito che un terzo dell'intera popolazione era infetto da micobatteri. Ma solo il 6% delle persone può sviluppare la tubercolosi. Il più delle volte, è provocato da fattori avversi esterni o da un'immunità indebolita.

Il gruppo a rischio include le persone:

  • Contatto con pazienti con una forma aperta di tubercolosi (parenti, operatori sanitari);
  • HIV-infetti;
  • Con il diabete;
  • Rilasciato dalle colonie correttive.

Il test Quantiferon in Invitro è raccomandato a quelle persone controindicate a fare Mantoux o Diaskintest. Ad esempio, se una persona ha malattie acute o ricorrenti, è severamente vietato iniettare una sostanza tubercolina. Inoltre, durante il periodo di quarantena, non vengono effettuati test della pelle sui bambini. Alcune persone sono allergiche alla tubercolina, quindi questo tipo di ricerca per l'infezione da tubercolosi non è adatto a loro.

Per confrontare i vantaggi del test Quantiferon con il test di Mantoux o Diaskintest, è necessario familiarizzare con alcune funzionalità diagnostiche.